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本文主要介绍了和Lac基因有关的转录调控,重点分析了CRP在其中的作用。论文主要分为两部分。
第一部分主要介绍了实验体系的设计和构建实验体系所用到的各种分子生物学技术,最后介绍了在考虑了基因的转录,绿色荧光蛋白的折叠和细胞生长分裂对蛋白的稀释作用后由测得的荧光值得到转录进行几率的方法。
第二部分是作者工作的主要部分。首先介绍了设计CRP结合位点序列的理论基础。然后,作者验证了Hill equation对于LacR抑制作用的描述的适用性。当作者使用Hill equation描述在诱导素cAMP诱导下CRP对转录的调控时,Hill equation无法解释作者测得的转录强度P与cAMP浓度变化曲线的后半部分的下降。同时作者还观察到细菌生长速度在外源cAMP浓度很高时会出现反常的下降。作者认为这两种以前被忽略的现象都源于在cAMP浓度很高时CRP与其非特异性位点的结合的大量增加。在此基础上作者给出的方程可以对实验测得的P-cAMP曲线进行良好的拟合,同时这一模型也可以对细菌生长速度的反常变化作出解释。由于蛋白与非特异性位点的结合是很常见的,因此作者的模型有可能成为对传统分子生物学关于基因调控理论的一个新的补充。