【摘 要】
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目的 验证自制中药复智散的神经保护作用,探讨其可能的作用机理.方法 Aβ25-35孵育SH-SY5Y细胞制作体外神经细胞损伤模型,检验MTT代谢率、LDH漏出率、细胞胞全面积和神经突长
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目的 验证自制中药复智散的神经保护作用,探讨其可能的作用机理.方法 Aβ25-35孵育SH-SY5Y细胞制作体外神经细胞损伤模型,检验MTT代谢率、LDH漏出率、细胞胞全面积和神经突长度,研究复智散可否抵制Aβ25-35神经毒性、保护神经细胞,应用Western-blot免疫印迹法检测神经细胞存活和死亡相关蛋白的变化;采用D-半乳糖老化小鼠模型研究复智散活体内神经保护效能,通过分析实验动物空间学习记忆能力、海马CA1区神经细胞计数和超微结构判定该药是否具有神经保护作用,利用免疫组织化学方法和Western-blot法调查涉及存活和死亡通路的多个蛋白,寻找药物潜在作用靶点.结果 复智散可防护Aβ25-35对 SH-SY5Y细胞的毒性,提高神经细胞存活率,稳定细胞膜,保证并保进细胞的生长;该药尚可对抗D-半乳糖的促老化效应,改善模型动物的空间学习记忆功能,保持海马神经元数量,维持神经元的正常形态和细胞器的正常结构.复智散促进神经细胞存活途径相关蛋白(NGF、PI3K、Akt、CREB、Bcl-2)的转录和表达,抑制死亡通路蛋白(Bax、CytC、AIF)的表达及激活,Nurrl、褪黑素受体及NgR亦是药物直接或间接的作用靶位.结论 体外和活体内实验均证明复智散具有神经保护功效,该药通过影响神经细胞存活/死亡途径相关蛋白质的表达和活性实现神经保护目的.
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