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目的：多发性硬化（multiple sclerosis MS）是一种以中枢神经系统炎性细胞浸润，白质脱髓鞘为主要特征的自身免疫性疾病。目前MS的发病机制尚不清楚，可能与免疫，感染，遗传，环境等因素有关。目前MS尚无特效治疗药物，本研究目的在于建立MS动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE），研究诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)和骨桥蛋白(osteopontin, OPN)在EAE中的动态表达，并使用依达拉奉注射液进行干预，研究其治疗作用。方法：1建立动物模型将动物麻醉，迅速取脊髓全长并称重，按全脊髓重量与冰盐水体积为1:10的比例，制成豚鼠全脊髓匀浆(GPSCH),再与等量含6mg/ml卡介苗的完全福氏佐剂(CFA)充分混合,即为完全免疫抗原。将上述免疫抗原按0.5ml／只于大鼠四肢足垫、背部皮下注射，免疫动物。2实验分组及干预将健康雌性Wistar大鼠70只随机分为三组，对照组10只，EAE组30只，依达拉奉干预组30只。根据预实验结果，在免疫后第10天，各组随机取5只大鼠作为发病前组，以后各组随机取发病后3天和发病后7天的大鼠各5只，记为3天组（高峰期组）和7天组（缓解期组）。自免疫当天起给予干预组大鼠依达拉奉注射液10mg·kg-1·d-1腹腔注射，对照组和EAE组大鼠给予生理盐水1ml/d腹腔注射直至处死。3神经功能评分自免疫当天起每只大鼠称重，观察大鼠的精神状态，进食水情况，大小便情况及活动情况。按照Kono提出的标准，进行神经功能评分。4实验指标观察使用10%水合氯醛麻醉动物，将脊髓固定于多聚甲醛中，取脊髓腰膨大部分，制成蜡块，HE染色观察炎性细胞浸润情况，免疫组化染色观察iNOS和OPN阳性细胞数目。5统计学方法采用SPSS13.0统计学软件进行统计学分析，计量资料使用均数士标准差表示，多个计量资料均数比较使用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，组间两两比较使用SNK-q检验。计数资料的比较使用卡方检验，检验水准取α=0.05。结果：1动物发病情况的观察大鼠免疫后逐渐出现精神萎靡，皮毛不光滑，食欲下降，体重减轻，发病时先出现尾部无力,继而出现后肢，前肢无力,大小便失禁，多数动物伴有双后肢关节肿胀。（1）起病时间的比较EAE组大鼠平均起病时间为(12.50±1.52)天，依达拉奉干预组起病时间延长,为(15.67±1.37)天,两组比较有统计学意义(P<0.05)。（2）发病率的比较EAE组30只大鼠中发病24只，发病率80%，依达拉奉干预组30只大鼠中发病16只,发病率53.33%，两组比较有统计学意义(P<0.05)。（3）神经功能评分的比较EAE3天组(3.20±0.84),7天组(1.60±0.55)，相比有统计学意义(P<0.05)。依达拉奉干预3天组(2.00±1.00),7天组(0.40±0.55),相比有统计学意义(P<0.05)。同一时间点两组比较均有统计学意义(P<0.05)。2组织病理学观察（1）对照组未见炎性细胞浸润及血管袖套形成。（2）发病前EAE组可见少量炎性细胞浸润，依达拉奉干预组可见散在炎性细胞浸润，均未见血管袖套形成。（3）发病后第3天EAE组可见大量炎性细胞浸润，围绕于血管周为形成血管袖套。依达拉奉干预组可见较多炎性细胞浸润，血管袖套数目较EAE组少。（4）发病后第7天EAE组炎性细胞及血管袖套较前均减少，依达拉奉干预组炎性细胞较前减少，未见血管袖套。3免疫组化染色指标观察3.1iNOSiNOS主要表达在巨噬细胞，单核细胞等炎症细胞，小胶质细胞及少量的星形胶质细胞和神经元也表达iNOS，本研究主要计数炎症细胞。（1）发病前EAE组免疫阳性细胞数目（20.53±2.67）,依达拉奉干预组免疫阳性细胞数目（14.13±2.88），两组比较有统计学意义(P<0.05)。（2）发病后第3天EAE组免疫阳性细胞数目（22.60±2.72），依达拉奉干预组免疫阳性细胞数目（16.93±2.89），两组比较有统计学意义(P<0.05)。（3）发病后第7天EAE组免疫阳性细胞数目（11.33±2.26），依达拉奉干预组免疫阳性细胞数目（10.60±1.64），两组比较无统计学意义(P>0.05)。（4）EAE组3个时间点两两比较：发病前组与3天组比较无统计学意义(P＞0.05)。发病前组，3天组分别与7天组比较均有统计学意义(P<0.05)。（5）依达拉奉干预组3个时间点两两比较：发病前组与3天组比较无统计学意义(P＞0.05)。发病前组，3天组分别与7天组比较均有统计学意义(P<0.05)。3.2OPNOPN主要表达在白质及灰白质交界区的炎症细胞，星形胶质细胞，小胶质细胞，少量表达在神经元，本研究主要计数炎症细胞。（1）发病前EAE组免疫阳性细胞数目（19.87±2.92），依达拉奉干预组免疫阳性细胞数目（10.53±2.23），两组比较有统计学意义(P<0.05)。（2）发病后第3天EAE组免疫阳性细胞数目（29.60±5.03）,依达拉奉干预组免疫阳性细胞数目（22.73±1.62），两组比较有统计学意义(P<0.05)。（3）发病后第7天EAE组免疫阳性细胞数目（11.27±2.58）,依达拉奉干预组免疫阳性细胞数目（8.00±1.56），两组比较有统计学意义(P<0.05)。（4）EAE组3个时间点两两比较：发病前组，3天组，7天组两两比较均有统计学意义(P<0.05)。（5）依达拉奉干预组3个时间点两两比较：发病前组，3天组，7天组两两比较均有统计学意义(P<0.05)。结论：1依达拉奉干预后可以推迟EAE大鼠发病时间，降低发病率，减轻临床症状。2依达拉奉干预后可减轻EAE大鼠脊髓内炎性细胞浸润程度。3依达拉奉干预后降低不同发病时期iNOS和OPN表达程度。4推测依达拉奉对EAE有一定的治疗作用。