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目的:观察亚毒性剂量雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)与低浓度奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)联合用药对人结肠癌HCT116细胞的杀伤效果及对凋亡的影响。
方法:应用MTT法检测奥沙利铂、雷帕霉素单药及联用对细胞的增殖抑制作用;CalcuSyn2.0软件计算药物半数抑制浓度(IC50)及奥沙利铂和雷帕霉素联合用药指数(CI);流式细胞术和Western印迹法检测药物对细胞凋亡的影响。
结果:以MTT法测定不同浓度奥沙利铂、雷帕霉素作用于HCT116人结肠癌细胞系48小时后的细胞增殖抑制率,绘制生长抑制曲线。二者的48小时单药IC50分别为8.31±0.78/μmol/L(r=0.99)和223.44±38.10nmol/L(r=0.94)。10nmol/L(IC20)的雷帕霉素与1μmol/L(IC20)或2.5μmol/L(IC30)的奥沙利铂联合应用后CI值分别为0.52和0.72。1μmol/L奥沙利铂与10nmol/L雷帕霉素联合用药组的细胞增殖抑制率为31%,约为同浓度单药组的2倍(p<0.05)。10nmol/L雷帕霉素处理组的凋亡率与对照组无差别,1μmol/L L-OHP与10nmol/L RAPA联合用药组的凋亡率高于L-OHP单药。联合用药48小时后剪切型PARP(polyADP-ribose polymerase)蛋白表达水平高于单药组。
结论:不同浓度奥沙利铂和雷帕霉素对HCT116细胞的增殖抑制作用呈浓度依赖性;1μmol/L奥沙利铂与10nmol/L雷帕霉素联合应用可产生协同作用;10nmol/L雷帕霉素可增强1μmol/L奥沙利铂诱导结肠癌细胞的凋亡作用。