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氨基酸不仅是蛋白质合成的基本原料，还具有调节生理生化代谢的作用。氨基酸还能作为信号分子调节基因表达。本研究以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为研究对象，建立氨基酸调控泌乳的泌乳细胞模型，指出了真核翻译起始因子5（eukaryotic translation initiation factor5,eIF5）在泌乳调节中的调控作用。 本实验采用组织块法培养乳腺上皮细胞，酶解法纯化得到的乳腺上皮细胞呈多边形，圆形或椭圆形，细胞之间排列紧密。用免疫荧光和免疫印迹（Western Blotting，WB）的方法检测纯化的原代乳腺上皮细胞的纯度和乳蛋白合成功能。此外，用同样的方法鉴定了纯化的奶牛乳腺上皮细胞中CSN2的表达，结果表明纯化后的乳腺上皮细胞CSN2表达均呈阳性。添加了0.6mmol/L蛋氨酸的细胞培养液培养细胞，建立了氨基酸调控细胞泌乳的泌乳细胞模型。用qRT-PCR和WB检测的结果表明，在经过蛋氨酸的处理后，细胞合成和分泌CSN2的能力显著增强。 过表达eIF5，用WB的方法检测细胞中CSN2的表达情况。实验结果表明，eIF5过表达后，奶牛乳腺上皮细胞中CSN2的表达显著上升。此外，添加蛋氨酸处理细胞，检测细胞中CSN2和eIF5的表达，结果表明，蛋氨酸在促进细胞中CSN2表达的同时也能促进eIF5的表达，这从一定程度上说明eIF5可能在蛋氨酸调节奶牛乳腺上皮细胞中CSN2合成的过程中扮演重要的信号调节分子的角色。用Co-IP（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）和FRET（fluorescence resonance energy transfer,FRET）技术发现在奶牛乳腺上皮细胞中，eIF5与GARS有相互作用。此外，本实验还用定量 Co-IP和免疫荧光共定位等技术检测了添加蛋氨酸对细胞中CSN2、eIF5和GARS的表达以及eIF5与GARS相互作用的影响。结果表明，添加蛋氨酸上调细胞中CSN2表达的同时，细胞中eIF5和GARS的表达也显著增加（p<0.01），并且eIF5与GARS的结合也显著增加（p<0.01）。过表达和干扰GARS表达后，检测细胞中eIF5和CSN2的表达情况，结果表明，GARS过表达后，细胞中eIF5和CSN2的表达显著增加（p<0.01），干扰GARS表达后，细胞中eIF5和CSN2的表达显著降低（p<0.01）。在奶牛乳腺上皮细胞中，eIF5和GARS都参与了蛋氨酸调控乳蛋白合成的信号通路的调节，这种调节作用可能与eIF5和GARS的相互作用有关，并且在这个调节过程中，GARS可能处于eIF5的上游。