【摘 要】
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目的:研究在乳腺癌发病过程中,铁调素(Hepcidin)与趋化因子CXCL1相关性;铁调素对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖和迁移的影响及其作用。方法:临床试验:收集临床58例乳腺癌术前患者癌组织、癌旁非癌组织(35cm)和远端正常组织(>5cm)样本及血液样本,25例健康志愿者血清标本。ELISA检测血清中Hepcidin的表达。细胞实验:人源性乳腺癌细胞株MDA-MB-231常规培养
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目的:研究在乳腺癌发病过程中,铁调素(Hepcidin)与趋化因子CXCL1相关性;铁调素对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖和迁移的影响及其作用。方法:临床试验:收集临床58例乳腺癌术前患者癌组织、癌旁非癌组织(3~5cm)和远端正常组织(>5cm)样本及血液样本,25例健康志愿者血清标本。ELISA检测血清中Hepcidin的表达。细胞实验:人源性乳腺癌细胞株MDA-MB-231常规培养。0μmol/L、1μmol/L、2μmol/L,4μmol/L浓度的Hepcidin加入MDAMB-231细胞中,MTT实验检测各组细胞在24h、48h、72h增殖情况;划痕实验检Transwell迁移实验检测各组细胞迁移能力;流式凋亡细胞术检测加入不同浓度的Hepcidin,细胞的凋亡情况;qRT-PCR检测4μmol/L Hepcidin浓度时乳腺癌MDAMB-231细胞中CXCL1和CXCR2的表达水平;Western blot检测对照组和Hepcidin刺激组CXCR2、PI3K、AKT及其磷酸化水平。结果:乳腺癌患者血清中Hepcidin的表达显著高于正常对照组;与对照组相比,4μmol/L Hepcidin在48h和72h能够明显促进MDA-MB-231细胞增殖;1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L Hepcidin都能够促进MDA-MB-231细胞的迁移,而且随着浓度增高,迁移得越快;加入不同浓度的Hepcidin,细胞凋亡减少,且随着Hepcidin浓度的增高,细胞凋亡数逐渐减少。由此可以推测,Hepcidin抑制乳腺癌细胞的凋亡。实时定量PCR结果表明,Hepcidin刺激组CXCL1的相对表达量显著高于正常对照组;免疫印迹结果表明,Hepcidin刺激组在CXCR2,p-PI3K和pAKT表达量明显增高。结论:揭示乳腺癌发展的过程中,Hepcidin和趋化因子CXCL1表达增加,且hepcidin能够上调CXCL1的产生;Hepcidin在乳腺癌患者血清中高表达,其通过促进CXCL1/CXCR2的表达,PI3K/AKT的进一步活化,是其促进乳腺癌MDAMB-231细胞增殖和迁移的可能途径
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