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功能核酸(适配体、核酶、脱氧核酶和适配体核酶)因其特异性的配体结合能力和多效的催化活性,近年来备受研究人员的关注。富含鸟嘌呤的寡核苷酸在某些离子的诱导下可发生结构变化,折叠形成G-四联体,再进一步结合血红素,可形成DNA酶。DNA酶是一种具有辣根过氧化物酶活性的功能核酸。微流控顺序注射法精度高、重现性好、试剂消耗量少、检测通量高,化学发光法灵敏度高、无需外加光源、线性范围宽,将微流控顺序注射和化学发光法联用能兼具二者优点,整套实验装置高效低耗、易于微型化,在生化分析领域的应用前景明确。本论文共分两章：第一章为绪论部分,着重综述了三类功能核酸及各自的主要作用。介绍了由钾离子诱导形成的DNA酶的构成、功能,基于DNA酶增敏检测钾离子的方法,以及基于DNA酶扩增的信号放大技术。同时,对微流控顺序注射-化学发光法的联用技术进行了综述。第二章,开展基于DNA酶增敏的微流控化学发光法进行生物分析的研究。首先研究了DNA酶的合成,通过钾离子诱导富含鸟嘌呤的特定寡核苷酸形成G-四联体,然后结合血红素形成DNA酶；进而研究利用该DNA酶的催化活性,构建微量钾离子的化学发光分析法,成功应用于真实人体血清中的钾离子含量分析。在此基础上,进一步研究基于目标分子触发的杂交链反应(HCR)扩增技术,在目标分子总量不变的前提下,通过自组装扩增DNA酶,大大提高了检测灵敏度,并探索应用于阿尔兹海默病基因诊断相关的单核苷酸多态性研究。实验中,通过紫外可见光谱证明了G-四联体／血红素复合物的形成,优化了DNA酶的孵育条件；根据DNA酶的催化活性,挑选出了检测钾离子的寡核苷酸--AGRO100,进而优化了DNA酶催化化学发光的反应条件,发现储存于低温条件下的DNA酶具有较好的结构稳定性和长期的过氧化物酶催化活性。将该酶应用于人体血清中钾离子的检测,通过配对t检验进行了统计学分析,发现所建立的基于DNA酶增敏的微流控化学发光分析法与经典的电位分析方法无显著性差异,方法准确可靠。在上述已构建的基于DNA酶分析方法基础上,进一步研究了基于目标分子触发的杂交链反应扩增技术,扩增了DNA酶的总量,提高了本分析方法的检测灵敏度。实验重点研究以Tau蛋白的编码基因rs242557为模板的单核苷酸多态性,作为阿尔兹海默病的分子生物学诊断依据。实验结果表明本法的检测限可达(10-9molL-1)(10-15mol)DNA分子,初步验证了本方法在阿尔兹海默病相关的基因诊断方面的可行性。