【摘 要】
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细胞壁结合的β-葡聚糖酶对百合花粉管生长具有重要调节作用.为了更好的理解花粉管顶端生长的调控机制,我们对百合花粉管中的β-葡聚糖外切酶进行了分子水平的研究.该研究以
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细胞壁结合的β-葡聚糖酶对百合花粉管生长具有重要调节作用.为了更好的理解花粉管顶端生长的调控机制,我们对百合花粉管中的β-葡聚糖外切酶进行了分子水平的研究.该研究以百合花粉管中的β-葡聚糖外切酶为研究对象,根据其它植物中的β-葡聚糖外切酶的高度保守区域设计简并引物,利用RT-PCR技术,克隆得到了百合花粉管中β-葡聚糖外切酶基因的一段长为480bp的片断.根据该片断中的核酸序列设计特异引物,进行3-RACE-PCR,得到了该基因3端一段长约1.5kb的序列.目前,除5端一段较短序列尚未得到外,共克隆到了长为2052bp的片断.该片断编码604个氨基酸的多肽.同源性比较发现,该基因的蛋白质序列与水稻、大麦及金莲花中的β-葡聚糖外切酶基因均有较高的同源性.同时,利用Northernblotting的方法,研究了该基因在百合吸湿后花粉粒、花粉管不同生长时期的表达特征,发现此基因在百合吸湿花粉粒、花粉管不同生长时期(1.5小时,3小时)均有表达.该项目是对百合花粉管细胞中β-葡聚糖外切酶基因克隆和表达特征分析的首次研究,它为进一步研究百合花粉管细胞中的β-葡聚糖外切酶基因在各种组织中的表达特征、该酶在花粉管中的转运与分布、该酶在花粉管细胞内超微结构水平的分布奠定了良好的基础,并为进一步了解植物细胞生长的调节机理和植物有性生殖机理在分子生物学水平上提供新的实验证据.
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