论文部分内容阅读
分泌型磷脂酶A2(secreted phospholipase A2，sPLA2)是一类能够在磷脂二位酰基(Sn-2)位点选择性水解酯键的酶，与动脉粥样硬化、糖尿病、肥胖症、哮喘、心血管疾病等代谢性疾病及炎症疾病有重要的关系。PLA2G12B是sPLA2s家族成员之一，家族成员大都具有磷脂酶活性，但PLA2G12B在其活性位点由碱性的组氨酸突变为亮氨酸，可能导致其磷脂酶活性丧失。前期研究发现，PLA2G12B是调节极低密度脂蛋白(very low-density lipoprotein，VLDL)分泌的重要分子，PLA2G12B敲除小鼠发生严重的低血脂症，而肝脏中有大量的脂质积累。雌激素相关受体γ(estrogen-related receptorγ，ERRγ)在小鼠肝脏中高表达，并在葡萄糖、脂质、酒精等代谢过程中发挥重要作用;并且禁食和糖尿病会诱导ERRγ高表达。但是，ERRγ是否参与VLDL分泌的调控尚不清楚。 本论文第一部分阐明了PLA2G12B在ERRγ对VLDL分泌的调控过程发挥重要作用，并且这一过程受到胰岛素的影响。本文研究发现，ERRγ在转录水平调控PLA2G12B的表达，其共激活受体PGC-1α可以增强ERRγ对PLA2G12B的调控;并且ERRγ直接结合到PLA2G12B启动子上的ERRE顺式反应元件。深入研究发现，胰岛素也会下调PLA2G12B的表达，胰岛素激活PI3K-Akt途径，促使Akt磷酸化ERRγ，使其从细胞核转运到细胞质中，从而抑制了ERRγ的转录活性。有意思的是，ERRγ有2个选择转录产物ERRγ1和ERRγ2，二者均可以调控PLA2G12B的表达;而胰岛素不影响ERRγ2的转录活性。通过比对ERRγ1和ERRγ2的氨基酸序列发现，ERRγ1 N-端的23个氨基酸可能是ERRγ的出核转运信号。体内实验证明，在野生型小鼠中高表达ERRγ可以促进肝脏VLDL的分泌，敲低ERRγ的表达会降低肝脏VLDL的分泌速率;但是，在PLA2G12B敲除小鼠高表达ERRγ不会提高肝脏VLDL的分泌，敲低ERRγ的表达也不会进一步降低VLDL的分泌速率。 上述研究揭示了，胰岛素通过磷酸化途径影响了ERRγ1的转录活性，从而转录调节下游因子PLA2G12B的表达，从而影响了肝脏VLDL的分泌。