【摘 要】
：
采用酶切连接和重叠PCR连接两种方法将抗黑色素瘤单链抗体基因和去除N端信号肽的金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因进行融合,并将融合基因克隆于pET28-a表达载体的His标签下游.
论文部分内容阅读
采用酶切连接和重叠PCR连接两种方法将抗黑色素瘤单链抗体基因和去除N端信号肽的金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因进行融合,并将融合基因克隆于pET28-a表达载体的His标签下游.SDS-PAGE分析表明,两种构建方法均表达了相对分子量约50kD的蛋白条带,与预期目的蛋白分子量相符,主要以包涵体的形式存在,表达量占菌体蛋白的27﹪.将重组质粒在大肠杆菌中诱导表达,用盐酸胍溶解包涵体,Ni-NTA螯合层析柱一步法纯化包涵体,再通过透析使目的蛋白复性.凝胶灰度扫描显示蛋白纯度达90﹪,凝胶电泳呈单一条带,蛋白量达0.47mg/mL.用健康人外周血单个核细胞作为效应细胞,LDH法检测ScFv-SEA融合蛋白对LiBr黑色素瘤细胞、MCF7乳腺癌的体外抑制率.结果表明该融合蛋白可以通过活化效应细胞,对表达相关抗原的肿瘤细胞产生有效的抗增殖作用,而对不表达该抗原的肿瘤细胞作用不显著.说明该融合蛋白赋予了SEA抗黑色素瘤特异性.
其他文献
维生素D作为脂溶性类固醇衍生物,在生理上具有维持骨质钙磷代谢平衡的功能,有研究显示在免疫系统、内分泌系统、心血管系统疾病及部分肿瘤、炎症发生发展中维生素D发挥促细胞
摘要：物理是一门源于生活、生产，并推进生活和生产发展的一门学科，实验探究与实际应用实践对于物理的学习及应用起到重要作用。 关键词：物理课堂教学；物理课外学习与实践；学生科技意识 中图分类号：G633.7 文献标识码：A 文章编号：1992-7711（2016）06-0035 随着社会的不断进步，物理知识和物理原理在人类生活各个领域中的突出地位不断凸显。在现代科技发展和科技教育中，增强学生的科
卵巢癌是妇科常见恶性肿瘤之一,由于卵巢位于盆腔的深部,体积较小,又缺乏典型症状及体征,发现时多数即为晚期,高复发率、高死亡率和低存活率对妇女的生活构成了严重的威胁.上
近几年,松果采摘对红松林的健康构成了极大的威胁.该文在野外调查研究的基础上,结合史料分析研究了松果采摘对红松地面种源贮藏量分布状况、红松林主要乔木树种组成和幼苗幼
猕猴桃和葡萄的茎尖超低温保存后的平均再生率分别为45﹪和30﹪.猕猴桃和葡萄再生植株的繁殖系数和生根率分别在第2次继代和第4次继代时达到了对照植株的水平并在以后的继肛中与
配电网处于电力系统末端,直接影响着用户的电能质量。合理的无功补偿可以提高系统电压、改善功率因数、降低系统损耗。随着配电网规模的日益扩大,社会和电力企业自身对配电网运行可靠性和经济性要求越来越高,无功补偿越来越受到重视。因此,合理地确定补偿地点和容量,选择补偿方式对电网安全经济运行有着重大意义。本文研究和分析了各种无功优化模型,指出了简化梯度算法的缺点,并在此基础上进行改进,提出了一种新的算法—改进
Many artificial intelligence (AI) processing tasks,especially those related to deep neural networks (DNNs),are both computation and memory intensive.Yet the tra
Recent years,the deep leing algorithm has been widely deployed from cloud servers to terminal units.And researchers proposed various neural network accelerators
从生态地理背景论草地畜牧业产业在黄土高原农业可持续发展中的战略地位;黄土高原要实现生态与生产双赢的目标,契机是退耕还林还草,突破口是建立能兼顾生态生产协调发展的主
对于许多遗传性的疾病，获取病人的体细胞将其重编程为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell，iPS)，然后将诱导多能干细胞中的致病基因修复，再将修复好的诱导多能干细胞分