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目的： 探讨吗啡对HepG2细胞增殖、活性、凋亡及细胞周期的影响及其与NF-κB信号通路的关系。 方法： 1.吗啡对HepG2细胞活性、增殖、周期和凋亡的影响 培养人肝癌HepG2细胞生长至对数期，接种到细胞培养板继续培养24h。将细胞随机分成5组：对照组（C组），100μmol/L吗啡组（M1组），300μmol/L吗啡组（M2组），500μmol/L吗啡组（M3组），1000μmol/L吗啡组（M4组）。C、M1、M2、M3和M4组的HepG2细胞分别用0μmol/L、100μmol/L、300μmol/L、500μmol/L、1000μmol/L的吗啡持续作用48h，然后采用CCK-8法、流式细胞仪及EdU法分别检测各组细胞活性、凋亡率、细胞周期及增殖率。 2.吗啡和纳洛酮/PDTC对HepG2细胞增殖、周期和凋亡的影响 用免疫荧光法检测HepG2细胞内的阿片受体分布。培养人肝癌HepG2细胞生长至对数期，接种到细胞培养板继续培养24h。将细胞随机分成6组：对照组（C组），100μmol/L纳洛酮组（N组），100μmol/L纳洛酮加300μmol/L吗啡组（MN组），300μmol/L吗啡组（M组），50μmol/L PDTC组（P组）和50μmol/LPDTC加300μmol/L吗啡组（MP组）。MN组和MP组HepG2细胞在贴壁后，先在新鲜培养基中分别加入纳洛酮和PDTC，使其浓度分别为100μmol/L和50μmol/L，37℃、5%CO2孵育30min后再将吗啡加入培养基中，使其终浓度为300μmol/L。对照组加入DMSO，其他3组分别加入对应浓度的药物。药物作用48h后，采用CCK-8法、流式细胞仪及EdU法分别检测各组细胞活性、凋亡率、细胞周期及增殖率。 3.吗啡通过NF-κB信号通路影响HepG2细胞的凋亡 培养人肝癌HepG2细胞生长至对数期，接种到细胞培养板继续培养24h。将细胞随机分成6组：对照组（C组），100μmol/L纳洛酮组（N组），100μmol/L纳洛酮加300μmol/L吗啡组（MN组），300μmol/L吗啡组（M组），50μmol/L PDTC组（P组）及50μmol/LPDTC加300μmol/L吗啡组（MP组）。药物作用48h后分别提取细胞蛋白通过RT-RCR和Western blot检测Caspase-8、Bcl-2、Bax的mRNA水平，以及Akt、p-Akt(Ser473)、p-NF-κB P65、NF-κB P65(Nuc)、IκBα、p-IκBα、Caspase-8、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平。 结果： 1.吗啡对HepG2细胞活性、增殖、周期和凋亡的影响 与对照组相比，M1、M2、M3以及M4组细胞的增殖抑制率和凋亡率依次增高（p＜0.05）。四组实验组细胞和C组相比，增殖率依次降低（p＜0.05）。与C组相比较，M1至M4组细胞S期细胞比例增加，G2-M期细胞比例减少（p＜0.05），G0/G1期细胞比例差异无统计学意义。 2.吗啡和纳洛酮/PDTC对HepG2细胞增殖、周期和凋亡的影响 免疫荧光结果显示，HepG2细胞内有大量阿片受体存在。与对照组相比，N组和MN组HepG2细胞增殖抑制率和凋亡率均无明显差异；而M组和P组及MP组高于C组，具有统计学意义（p＜0.05）。与C组相比较，N组和MN组细胞增值率均无明显差别；而M组和P组及MP组HepG2细胞增殖减少，差异有统计学意义（p＜0.05）。与对照组相比，N组和MN组各细胞周期分布均无明显差别；而M组和P组及MP组HepG2细胞S期的细胞百分数增多，差异有统计学意义（p＜0.05）。 3.吗啡通过NF-κB信号通路影响HepG2细胞的凋亡 与对照组相比,M组、P组及MP组Bcl-2和caspase8mRNA表达水平都有所降低，Bax mRNA的表达升高，差异具有统计学意义（p＜0.05）；而N组和MN组三项指标的mRNA表达水平均无明显变化。与C组相比，M组、P组和MP组的p-Akt、p-NF-κB P65、NF-κB P65(Nuc)、Caspase-8、Bcl-2蛋白表达降低，p-IκBα、Bax的表达量增高，差异具有统计学意义（p＜0.05）；Akt和IκBα的表达无明显变化。N组和MN组与对照组相比较，各蛋白表达量差异均无统计学意义。 结论： 吗啡可以抑制人肝癌HepG2细胞增殖、诱导其凋亡，并引起HepG2细胞周期S期阻滞，且吗啡的这种作用与阿片受体及NF-κB信号通路有关。