【摘 要】
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目的 研究纤粘连蛋白(fibronectin,FN)对Hela细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)表达的影响及机理.方法 无血清培养Hela细胞,以FN作为细胞外基质(extr
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目的 研究纤粘连蛋白(fibronectin,FN)对Hela细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)表达的影响及机理.方法 无血清培养Hela细胞,以FN作为细胞外基质(extracellular matrix,ECM),用不同浓度FN及同一浓度FN作用不同时间诱导Hela细胞;并用反义寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)封闭FN-整合素介导的信号转导途径中关键分子--焦点粘着激酶(focal adhesion kinase,FAK).用MTT法检测Hela细胞的粘附率及光镜下计数Hela细胞的铺展率并观察Hela细胞形态的变化;用酶谱分析方法检测MMP-2活性;经RT-PCR观察MMP-2mRNA的表达.结果 无FN作用的Hela细胞不发生粘附及铺展,亦无明显MMP-2表达;当FN浓度为5~10μg/ml时,粘附率及铺展率最大;当FN浓度为10μg/ml作用时间为4h时,粘附的Hela细胞启动MMP-2mRNA的表达;当FN浓度为10μg/ml作用时间为12h时,MMP-2活性最大.当在培养液中加入人工合成的pp<125FAK>反义ODN后,MMP-2活性明显降低.结论 FN可诱导Hela细胞粘附,进而引发一系列细胞内信号转导机制,启动MMP-2mRNA表达,影响MMP-2活性.这一作用可能经以FAK作为关键分子的Grb2/Ras/MAPKs信号转导途径完成的.
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