厦门海域多环芳烃降解菌降解特性和机制研究

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该文首先对PAHs降解菌的来源地——厦门海域进行了一些与环境污染状况相关的生物学参数调查研究,再对降解菌的一些特性与机制进行了初步探讨.主要结果如下:1.首先,对厦门海域设置的15个主要站位进行了一些与环境污染相关的生物学参数如细菌总数、粪大肠杆菌总数和PAHs降解菌菌数等的初步调查.2.通过显微镜、电镜观察等,获得了一些降解菌的形态特性和生理生化特征;通过16S rDNA序列的测定并与Genebank中数据进行相似性分析,初步确定:降解菌芘1为Ochrobactrum sp.,芘6为Pandoraea sp.,芘22为Ochrobactum sp.3.利用正交试验法优化了降解菌菲2、芘1、芘6的生长条件(温度、海水(S)、pH和营养盐(2216E的)),结果如下:菲2为31℃,pH7.6,1/4海水和2倍2216E中的营养盐;芘1为31℃,pH6.6,1/4海水和4倍2216E中的营养盐;芘6为31℃,pH5.6,1/4海水和4倍2216E中的营养盐.4.通过监测降解PAHs过程中降解菌菲2、芘1和芘6的CFU/ml的变化情况,并同时采用HPLC方法测定了菲2、芘1、芘6对菲、芘(起始浓度都为50mg/L)的降解效果.5.通过不同浓度的SDS、吖啶橙对降解菌芘1、芘6、菲2和菲4进行质粒消除实验,初步证实了芘6的降解芘的基因可能在自带的质粒上,而芘1、菲2和菲4还不能确定相关降解基因与质粒有关.6.优化了降解菌芘1、芘6、菲2的基因组提取方法,采用以pBV220质粒在大肠杆菌JM101中构建了基因组文库,利用PAHs作为选择压力筛选到了芘1基因组文库中的51株阳性克隆子,并用靛蓝生成实验验证了阳性克隆子12838和12842上存在降解芘的加氧酶基因.
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