前列腺癌中microRNA-203的表达研究及预后相关因素分析

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背景和目的:前列腺癌(Prostate carcinoma, PCa)是最常见的泌尿系统恶性肿瘤,在我国的发病率呈逐年升高的趋势。外科手术或激素治疗是目前最有效的治疗措施,但易复发、转移,严重影响患者预后生存。PCa的发病机制至今仍未阐明,多种基因水平调控方式可能共同参与疾病的诸多重要环节。最近研究表明,非编码小分子中的一员——microRNA (miRNA)通过转录后调控机制影响特定蛋白的差异表达,与肿瘤的生成及进展密切相关。本研究拟通过检测不同前列腺组织中miRNA-203 (miR-203)的含量及P63、YKL-40、Survivin等蛋白的表达情况,探讨各指标在前列腺癌发生发展中的作用及综合评价患者预后的价值。方法:收集2003年-2008年山西医科大学第一医院手术切除、有完整随访资料的病理科存档前列腺癌(PCa)蜡块组织56例、前列腺良性增生症(BPH)组织10例,所有标本均经常规HE染色确定诊断,依据Gleason分级标准对PCa进行组织学分级。其中,30例PCa组织及10例BPH组织采用Real-time PCR检测miR-203的表达水平,免疫组织化学En Vision法检测P63蛋白表达情况:56例PCa组织中YKL-40蛋白、Survivin蛋白的表达采用免疫组织化学En Vision法,分析各个指标与临床病理学参数之间的关系;采用Spearman秩相关分析miR-203与P63蛋白在不同前列腺组织中表达的相关性。Kaplan-Meier法分析不同分组的生存曲线,多变量Cox比例风险回归模型筛选影响患者生存的独立预后因素。应用SPSS 13.0软件包进行统计学分析。结果:1.BPH与前列腺癌组织中的miR-203表达差异有显著性(P<0.05)。随着前列腺癌Gleason积分的增加,miR-203的相对表达量呈逐渐升高的趋势。BPH与GS7-8分、BPH与GS9-10分、GS7分与GS7-8分、GS<7分与GS9-10分的组间比较均具有统计学差异(P<0.05),miR-203的表达量分别增加了2.8倍、3.1倍、2.7倍、2.9倍;而BPH与GS<7分、GS7-8分与GS9-10分的组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.不同临床分期的前列腺癌组织中miR-203的表达具有显著性差异(P<0.05);临床晚期病例组的miR-203表达量明显高于临床早期病例组。前列腺癌临床D期与前列腺良性增生症、前列腺癌临床A期、临床B期、临床C期相比较,miR-203的表达量分别增加了3.8倍、8.7倍、2.4倍、1.7倍。3.miR-203的表达与是否发生骨转移有关(P<0.05),与未发生骨转移的病例组相比较,发生骨转移的病例组miR-203的含量增加了1.9倍;此外,miR-203的表达与血清tPSA水平及是否复发无相关性(P>0.05)。4.P63蛋白在BPH组织中全部阳性表达;30例前列腺癌中,27例为P63蛋白表达缺失,3例出现较少的、间断的P63蛋白微弱表达。Spearman秩相关分析结果显示,miR-203水平与P63蛋白表达呈负性相关(r=-0.449,P<0.05)。5.在前列腺癌中,YKL-40阳性表达41例(73.21%), Survivin阳性表达45例(80.36%),二者表达呈正相关(r=0.480,P<0.05),并与Gleason积分及伴发骨转移相关(P<0.05)。6.分析患者临床预后,Gleason积分高、miR-203高表达,YKL-40高表达、Survivin高表达的患者术后生存时间明显缩短(P<0.05);多变量Cox比例风险回归模型最终确定Gleason积分、miR-203、YKL-40是影响前列腺癌患者预后的独立因素。结论:1. Real-time PCR结果显示,miR-203的表达水平在前列腺癌组织中明显升高,并随着肿瘤恶性程度的增加呈现上调性表达趋势,在前列腺癌的发生发展中发挥着致癌性miRNA的调控作用。2.P63蛋白在BPH中表达,而在前列腺癌中表达缺失或仅有微量表达;miR-203水平升高与P63蛋白缺失平行相关,miR-203可能是前列腺癌中P63表达缺失的分子调控机制之一。3. miR-203、YKL-40与Survivin显著高表达与Gleason积分增高及临床晚期、伴发骨转移有关,在前列腺癌的恶性转归与肿瘤进展中发挥着重要作用。4. Gleason积分高、伴发骨转移、miR-203高表达、YKL-40高表达、Survivin高表达与前列腺癌患者的预后不良密切相关,将其用于评估病人生存风险,对提高患者生存率和改善生存质量具有一定的指示意义。
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