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本研究的目的是体外筛选以转铁蛋白受体(transferrinreceptor，TfR)为报告基因的内皮抑素(Endostatin，ES)逆转录病毒，并检测其体外表达情况及治疗效果，以期为下一步活体分子成像研究奠定基础。
方法:用阳离子脂质体将转铁蛋白受体(TfR)为报告基因的重组逆转录病毒载体pLP-LNCX-ES-IRES-TfR(pLET)转染包装细胞PT67，通过G418浓度梯度筛选出阳性克隆。收集培养细胞上清液进行病毒滴度测定，并体外转染人肝癌细胞HepG2。MTT法绘制细胞生长曲线，观察ES对肿瘤细胞生长的影响；转染率测定及RT-PCR检测ES基因的表达情况；免疫组化法测定ES蛋白质的表达情况；鸡囊胚法观察ES对血管生成的抑制。
结果:(1)建立稳定表达的PT67-RV-ES包装细胞系，其病毒滴度为4×107cfu/ml(2)病毒率为32％，转染细胞的荧光定量RT-PCR结果见TfR基因较未转染的HepG2细胞表达高，且从24h即开始表达，至72h达高峰后持续表达；免疫组化可见细胞浆中ES蛋白表达；(3)病毒对HepG2细胞生长未见明显的抑制作用；(4)鸡囊胚法见病毒液对血管生成有抑制作用。
结论:逆转录病毒pLET在体外能有效感染肿瘤细胞HepG2，能表达具有活性的目的蛋白，且对肿瘤细胞生长无明显抑制作用，此病毒可进一步通过转铁蛋白受体(TfR)的分子成像在活体观察基因治疗的效果并揭示肿瘤早期局部生长、远隔部位转移的发生、发展。