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目的:
研究肠胃清方及其拆方对人大肠癌耐药细胞株多药耐药的逆转作用及其可能的机理。
方法:
本研究共分为五组:肠胃清方组、益气健脾方组、理气解毒方组、空白血清组、空白对照组。采用MTT法测定肠胃清及其拆方组药物血清对HCT-8/V细胞株的逆转指数;HPLC测定细胞内的VCR浓度;FCM测定细胞膜P-gp蛋白的表达。
结果:
1、HCT-8/V细胞株对VCR、DDP、5-FU、MMC的耐药指数分别为18.6、22.3、4.3、3.6。
2、肠胃清方逆转HCT-8/V细胞株对VCR及DDP耐药性的逆转指数分别为3.3和7.5、益气健脾方逆转指数分别为1.7和3.6、理气解毒方分别为2.0和4.7、空白血清组分别为1.0和1.0,肠胃清及其拆方各组逆转HCT-8/V细胞株对VCR及DDP耐药性的逆转指数明显高于对照组(P<0.01),肠胃清方高于其他各组(P<0.05),理气解毒方逆转HCT-8/V细胞株对VCR耐药性的逆转指数高于益气健脾方(P<0.05)、对DDP耐药性的逆转指数略高于益气健脾方(P=0.063)。
3、肠胃清方组、益气健脾方组、理气解毒方组、空白血清组、空白对照组的细胞内VCR药物浓度分别为(83.40±7.17、33.56±3.34、58.56±6.70、8.67±1.86、9.57±1.23)ng/5*105 细胞,肠胃清及其拆方各组细胞内药物浓度明显高于空白血清组和空白对照组(P<0.01),肠胃清方高于两拆方组(P<0.01),理气解毒方高于益气健脾方(P<0.01)。
4、肠胃清方组、益气健脾方组、理气解毒方组、空白血清组、空白对照组细胞膜蛋白P-gp蛋白的荧光强度(100%Total)分别为(6.51±3.82、60.32±14.39、17.56±2.85、84.1±5.15、84.79±6.10)%,肠胃清及其拆方各组P-gp蛋白表达显著低于空白血清组与空白对照组(P<0.01),肠胃清方低于两拆方组(P<0.05),理气解毒方低于益气健脾方(P<0.01)。
结论:
肠胃清及其拆方能够逆转HCT08/V细胞株的多药耐药性,其作用与增加细胞内化疗药浓度有关,降低细胞膜P-gp蛋白的表达是其机理之一。逆转耐药作用强度依次为肠胃清方、理气解毒方、益气健脾方。肠胃清方中益气健脾法与理气解毒法联合应用具有协同增效作用,其中理气解毒法具有重要的作用。