艾叶易挥发性成分及对高尿酸血症作用的研究

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艾叶是菊科植物艾草的干燥叶,是中医临床常用药之一,人们在端午节有挂艾、饮艾酒等习俗;近年来艾灸也越来越受人们青睐,而艾叶的挥发性成分及其相应的生理活性,也就愈来愈引起人们重视;高尿酸血症,作为现如今发病率较高的疾病,也被人们广泛关注,化学药物对人体的副作用较大,研发治疗高尿酸血症的天然产物就尤为重要。因此,研究艾叶化学组成及对高尿酸血症的影响,对艾叶的应用及新产品开发具有重要意义。本文以山西霍州产艾叶为主要研究对象,系统地考察和优化了艾叶易挥发性成分富集、分离、检测的条件,建立了顶空-固相微萃取-气质联用(Head Space Solid-Phase Micro-Extractions Gas Chromatography-Mass Spectrometry,HS-SPME-GC-MS)分析方法,并对其化学成分进行分析鉴定;其次,研究艾叶提取物对黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase,XOD)的抑制作用,抗氧化作用和对高尿酸血症小鼠肾功能、肝脏XOD活性的影响。具体研究内容及结果如下:(1)建立了艾叶易挥发性成分的分析方法系统考察了艾叶易挥发性成分分离富集的影响因素,确立了艾叶易挥发性成分的HS-SPME-GC-MS分析方法。最优参数为:50/30μm DVB/CAR/PDMS固相微萃取头、样品用量0.8 g/20.0 mL样品瓶、萃取温度75℃、萃取时间50 min、平衡时间30 min、解吸时间4 min。GC/MS条件为:HP-5MS色谱柱(30.0 m×250μm×0.25μm),进样口温度250℃;分流进样,分流比为5:1。(2)对艾叶燃烧前后易挥发性成分进行分析鉴定采用质谱、保留指数方法对艾叶燃烧前后易挥发性成分进行结构鉴定,面积归一化法对各组分的相对百分含量进行定量分析。艾叶燃烧前共检出196种化合物,确定结构132种,占易挥发性成分总量的94.00%,其中主要易挥发性成分是3-氨基吡唑、桉油精、β-杜松烯;艾叶燃烧后共检出143种化合物,确定结构104种,占易挥发性成分总量的88.22%,其中主要易挥发性成分是苯酚、乙酸、吲哚。(3)艾叶提取物对高尿酸血症作用的体内、外实验及抗氧化性研究采用蒸馏水、无水乙醇为溶剂结合超声波辅助及传统煎煮方法对艾叶进行提取,测定各提取物总黄酮和总酚含量、对XOD抑制作用的抑制率及抑制动力学、自由基清除能力;选择氧嗪酸钾盐作为高尿酸血症小鼠诱导剂,利用试剂盒测定小鼠血清尿酸(UA),肌酐(Scr),尿素氮水平(BUN),肝脏XOD活性。结果表明,艾叶醇提物总黄酮和总酚含量较大,抑制XOD和清除自由基效果较其他提取物好,对高尿酸血症小鼠的UA,Scr,BUN水平在一定程度上具有降低效果,对肝脏XOD活性具有抑制作用。
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