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益气化瘀生肌中药对糖尿病溃疡TGF-β1及其信号转导分子的影响目的:探讨益气化瘀生肌中药及其拆方促进糖尿病溃疡创面愈合的分子机制。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素和外科方法建立糖尿病大鼠全层皮肤缺损模型,以贝复剂为阳性对照,观察益气化瘀生肌中药(益气化瘀组)及拆方(益气组、化瘀组)创面的愈合情况,并运用免疫组化、图像分析和Westernblot的技术手段检测各组创面新生肉芽组织中TGF-β1、TGF-βRI、Smad3、Smad4的表达水平。
结果:1.糖尿病溃疡模型组(模型对照组)与正常组比较,创面愈合率明显较低,愈合时间明显延长(P<0.01);益气化瘀组、益气组、化瘀组与模型对照组相比创面愈合率明显较高,愈合时间明显缩短(P<0.01);益气化瘀组与益气组、化瘀组相比较,愈合率较高、愈合时间较短(P<0.05),与贝复剂组比较,差异无统计学意义(P>0.05);两拆方组间无明显差别(P>0.05)。
2.模型对照组TGF-β1表达水平明显低于正常组(P<0.01);益气化瘀组TGF-β1表达水平高于益气组、化瘀组、贝复剂组(P<0.05),明显高于模型对照组(P<0.01),与正常组无明显差别(P>0.05);益气组、化瘀组的TGF-β1表达水平也明显高于模型对照组(P<0.01),与贝复剂组无明显差别(P>0.05),两组间无明显差别(P>0.05)。
3.模型对照组TGF-βRI表达水平与正常组无明显差别(P>0.05);益气化瘀组创面TGF-βRI表达水平明显高其余各组(P<0.01);益气组高于化瘀组、贝复济组、模型对照组(P<0.05)。
4.模型对照组smad3、4表达水平明显高于正常组(P<0.01);益气化瘀组smad3、4表达水平低于贝复剂组(P<0.05)、模型对照组(P<0.01),与正常组无明显差别(P>0.05);且免疫组化提示益气生肌方组的smad3、4表达量也明显低于糖尿病模型组(P<0.01),但高于正常组(P<0.05),化瘀生肌方组明显低于糖尿病模型组(P<0.01),与正常组无明显差别(P>0.05);westernblot法提示化瘀组smad4的表达水平低于益气组(P<0.05)。
结论:1.糖尿病创面难以愈合的机制之一可能与TGF-β1表达水平下降,smad3、4的表达增多有关。
2.益气化瘀生肌中药可能通过促进创面TGF-β1、TGF-βRI的表达,并下调smad3、smad4的表达水平,促进创面愈合。
3.益气组、化瘀组在一定程度上也能上调TGF-β1,下调smad3、smad4的表达量,促进创面愈合;但益气组可能还通过促进创面TGF-βRI的表达促进创面愈合,而化瘀组在下调smad3、smad4的表达水平方面更为明显。