草鱼生长激素基因的克隆及原核表达研究

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该研究选用草鱼(Ctenspharynogodom idellus)作为实验材料,从草鱼脑垂体中提取总RNA.设计合成了一对草鱼生长激素基因的特异性引物,上游引物加入BamHI酶切位点;下游引物加入EcoRI酶切位点.应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆得到编码草鱼生长激素(CGH)的基因cDNA,并定向克隆到pUC18载体上.正反向测序结果分析表明:克隆的草鱼生长激素基因cDNA全长669bp,开放阅读框(ORF)包含633个碱基,编码210个氨基酸.分子量为23.6KD,等电点为6.28;疏水氨基酸占43.3﹪,亲水氨基酸占32.4﹪,碱性氨基酸占12.4﹪,酸性氨基酸占11.9﹪.将得到的序列在GenBank和EMBL数据库中进行了同源比较.
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