胃食管反流病舌象和舌苔脱落细胞相关指标的研究及中药干预疗效评价

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第一部分胃食管反流病患者舌象和舌苔脱落细胞的研究  目的:通过对胃食管反流病患者舌象和舌苔脱落细胞相关指标的观察和检测,分析舌象及相关指标与疾病、证型的相关性。  方法:  (1)利用舌象客观化识别分析技术,对146例胃食管反流病患者与23例正常人的舌象进行识别分析,观察舌象客观参数。  (2)刮取其舌苔制成舌脱落细胞标本,采用酶联免疫吸附实验(ELISA),检测胃食管反流病患者和正常人舌苔脱落细胞中相关免疫指标的表达。  (3)运用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-timePCR)技术检测胃食管反流病患者和正常人舌苔脱落细胞中miRNAs的表达。  (4)采用Excel整理数据资料,SPSS18.0和GraphPad Prism5软件统计分析。  结果:  (1)146例胃食管反流病患者,辨证分为肝胃郁热证、胆热犯胃证、中虚气逆证、气郁痰阻证、瘀血阻络证五型,比例分别为33.56%、22.60%、24.66%、11.64%、7.53%,其中肝胃郁热证所占比例最大,瘀血阻络证所占比例最小。  (2)146例胃食管反流病患者,舌色以淡红舌为主,占35.62%,红舌和淡紫舌也较多。苔色以白苔最多,占51.37%,其余为黄苔和淡黄苔。苔质以薄苔为主,占63.01%;其余为厚苔,占36.99%;腻苔出现频次较高,占65.07%。舌形以齿痕舌比例相对较高,占23.97%;胖大舌和裂纹舌也有一定比例。(3)146例胃食管反流患者中,肝胃郁热证舌色以淡红舌居多,占44.90%,其次是红舌;舌苔以黄苔为主,占51.02%,其次是淡黄苔。胆热犯胃证舌色以淡红舌和红舌为主,分别占36.36%和30.30%;舌苔以淡黄苔和黄苔居多。中虚气逆证舌色以淡红舌和淡紫舌为主,均为30.56%,舌苔以白苔为主。气郁痰阻证舌色以淡红舌为主,占41.18%,其次是淡紫舌;舌苔均为白苔。瘀血阻络证舌色以紫暗为主,占45.45%,其次为淡紫舌;舌苔以白苔为主。(4)胃食管反流病患者不同证型及与正常人舌色参数比较,结果示:肝胃郁热证、胆热犯胃证、瘀血阻络证与正常人比较,舌色参数S值有不同程度升高,差异明显,有统计学意义(P<0.05);各证型与正常人比较,舌色参数V值有不同程度降低,差异明显,有统计学意义(P<0.01)。舌色参数H值各证型与正常人比较,差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。(5)胃食管反流病患者不同证型及与正常人的苔色参数比较,结果示:肝胃郁热证、胆热犯胃证与正常人比较,苔色参数S值明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。苔色参数H值与V值各证型与正常人比较,差异不明显,均无统计学意义(P>0.05)。(6)胃食管反流病患者不同种证型与正常人舌形和苔质参数比较,结果示:各证型与正常人比较,腐腻参数差异明显,有统计学意义(P<0.05);肝胃郁热证、胆热犯胃证、中虚气逆证与正常人比较,厚薄参数差异明显,有统计学意义(P<0.05);胖瘦参数各证型与正常人比较差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。(7)与正常人比较,miR-203在胃食管反流病患者舌苔脱落细胞中呈显著低表达(P<0.0001);ROC曲线法分析结果显示,与正常人比较,舌苔脱落细胞miR-203诊断胃食管反流病的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.9295%可信区间为0.89-0.96。(8)与正常人比较,胃食管反流病患者舌苔脱落细胞中IgM,CD4的阳性细胞数目显著降低,CD4/CD8的阳性细胞数目比例计数显著降低,有统计学差异(P<0.05)。  结论:(1)舌象的舌色、苔色、腐腻、厚薄、胖瘦参数可以作为胃食管反流病的辨证依据参考。(2) miR-203或许可以作为胃食管反流病诊断的标志物。(3)胃食管反流病存在一定的T淋巴细胞紊乱,其可能参与胃食管反流病的免疫应答过程。  第二部分中医辨证治疗胃食管反流病临床疗效观察  目的:通过对中医辨证治疗胃食管反流病的临床疗效观察,分析治疗前后舌象和舌苔脱落细胞相关指标的变化,指出其对本病的诊断、辨证治疗、疗效评价及预后判断等提供客观依据,具有一定的指导意义。  方法:(1)本研究对85例(治疗前后均进行舌象拍照)的胃食管反流病患者进行疗效观察,按就诊顺序以2∶1随机分配至两组,中药治疗组55例、西药对照组30例。进行随机、平行开放对照临床试验。A:中药治疗组辨证分型后采用课题组相应协定方治疗;B:西药对照组采用雷贝拉唑胶囊治疗,每次10mg,每天两次,口服,连用八周(由上海信谊药物有限公司生产)。疗程8周,疗程结束后随访两周。(2)利用舌象客观化识别分析技术,观察药物干预治疗前后的舌象参数变化。(3)采用酶联免疫吸附实验(ELISA)实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)技术,观察药物干预治疗前后舌苔免疫指标及miRNAs表达变化的影响。(4)采用Excel整理数据资料,SPSS18.0和GraphPad Prism5软件统计分析。  结果:(1)临床主要症状改善情况,组内比较,两组治疗后反酸、烧心、胸骨后不适,反胃,嗳气积分与治疗前比较,均明显下降,有统计学意义(P<0.05)。组间比较,两组治疗后烧心、胸骨后不适、疼痛,嗳气积分差值比较,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后泛酸积分差值比较,差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。(2)症状有效率,治疗组为90.91%,对照组为73.33%,组间比较无显著性差异(P>0.05)。(3)两组治疗前后舌色参数变化,组内比较,两组舌色参数V值治疗前后比较,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。组间舌色参数比较,无统计学差异(P>0.05)。(4)两组治疗前后舌形和苔质参数变化,组内比较,两组腐腻参数、厚薄参数治疗前后比较,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。组间比较,胖瘦、腐腻、厚薄参数无统计学差异(P>0.05)。(5)两组治疗前后舌苔脱落细胞中miR-203的表达,组内比较,治疗后两组舌苔脱落细胞中miR-203的表达与治疗前比较大都呈现不同程度的上调,差异明显,有统计学意义(P<0.001);组间差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。(6)两组治疗前后舌苔脱落细胞免疫指标比较,治疗组CD4、CD4/CD8治疗前后比较显著升高,有统计学意义(P<0.05),对照组CD4、CD4/CD8治疗前后比较升高不明显,无统计学差异(P>0.05)。组间差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。  结论:(1)中医辨证治疗在改善临床主要症状方面疗效优于作用机制单一的西药。(2)舌象的舌色、苔色、腐腻、厚薄、胖瘦参数可以作为胃食管反流病疗效评价的依据,这是一项新的科研尝试。(3)miR-203或许可以作为胃食管反流病药物疗效评价的指标。
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