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研究目的:1.根据本课题组前期工作提供的方法,在无菌环境中制备载有血管内皮生长因子（VEGF）和万古霉素（VAN）的多层海藻酸钠（SA）-壳聚糖（CS）微球,在观察其表征及测定VEGF和VAN的载药量和包封率后,作为后续实验的对照组。2.通过纸片法实验测试该微球对金黄色葡萄球菌（ATCC25923）增殖的抑制作用,评判其是否具有体外抗感染能力。3.通过检测不同物理条件处理后,此微球的结构稳定性及所载药物的有效释放量,探讨该微球理想的储存条件。研究方法:1.参照前期实验,选择优化后的试剂配比在无菌条件下制备载VEGF/VAN多层SA-CS微球。将微球置于扫描电子显微镜（SEM）下,观察微球的表面和截面形态。将制备好的多层载药微球完全溶解,分别应用VEGF ELISA试剂盒和紫外分光光度计测定VEGF和VAN的载药量和包封率。2.将金黄色葡萄球菌（ATCC25923）复苏并接种于营养琼脂培养基上。将制得的微球浸泡于柠檬酸钠溶液中24h,取上清10μl,滴加至灭菌后的滤纸片上,之后将滤纸片置于培养基上,37℃恒温孵育24h。观察滤纸片周围是否出现抑菌环,测定抑菌环直径。3.将制得的载VEGF/VAN多层SA-CS微球分别置于-20℃、4℃、25℃、37.5℃、4500±500Lx的条件下5天和10天。通过SEM观察不同条件处理后微球的表面形态和截面形态。将不同条件处理后的微球浸泡于柠檬酸钠溶液中24h,取上清,通过VEGF ELISA试剂盒测定VEGF的有效释放量;通过紫外分光光度计测定VAN的有效释放量。研究结果:1.试剂配比优化后制备得到的载VEGF/VAN多层SA-CS微球表面观呈球形,直径在900-1100μm,表面完整,较光滑,局部存在些许褶皱;微球截面呈致密网状结构。VEGF的载药量为6.63×10-5%,包封率为72.1%;VAN的载药量为1.39%,包封率为3.37%。2.纸片法实验结果为,滤纸片周围抑菌环清晰可见,直径为12.61±1.01mm。3.经过不同条件处理后微球的表面形态和截面形态均无明显变化。微球内VEGF和VAN的有效释放量均有下降。VEGF的有效释放量测试结果表现为各实验组与对照组相比均存在明显差异（P<0.05）;VAN的有效释放量测试结果表现为除-20℃组与对照组无明显差异外（P>0.05）,其余各实验组与对照组相比均存在明显差异（P<0.05）。研究结论:1.成功在无菌条件下制备出试剂优化配比的载VEGF/VAN多层SA-CS微球。2.通过纸片法实验证明了该微球对金黄色葡萄球菌（ATCC25923）具有一定的体外抑菌能力。3.通过控制不同物理因素变量,证明了该微球结构稳定,但是储存温度的升高和不避光保存会导致微球内所载VEGF和VAN的有效释放量下降,且VEGF较VAN更为明显。