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目的:构建大鼠牙囊细胞(dental follicle cells, DFCs)、骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs)体外共培养模型,初步研究与大鼠BMSCs共培养对DFCs增殖、成骨分化的影响。方法:1.大鼠DFCs、BMSCs的体外分离、培养和鉴定。2.模型构建与分组。采用0.4um孔径Transwell小室构建大鼠DFCs、BMSCs体外共培养模型。共培养组:DFCs接种于Transwell小室配套孔板,BMSCs接种于Transwell小室,建立上下双层细胞共培养模型;对照组:仅将DFCs接种于Transwell小室配套孔板,单独培养。3.DFCs增殖活力检测。采用Transwell小室(24孔板规格)构建共培养模型,每组4个复孔,于共培养后第1、3、5、7天应用CCK-8检测法对DFCs增殖活力进行检测。4.DFCs ALP活性检测。采用Transwell小室(24孔板规格)构建共培养模型,每组6个复孔,于共培养后第7、14天对DFCs进行ALP活性检测。5.FQ-PCR检测DFCs成骨基因表达。采用Transwell小室(12孔板规格)构建共培养模型,每组6个复孔,共培养10天对DFCs成骨基因OCN、COL-I、BSP、Runx2进行基因检测,并计算其相对表达量。结果:1.成功制取、鉴定大鼠DFCs、BMSCs。2.DFCs增殖活力检测结果:与对照组相比,与BMSCs共培养后第1天,DFCs增殖活力未见明显变化,第3天DFCs增殖活力开始增强;第5天、7天共培养组DFCs增殖活力>单独培养组DFC(sP<0.05)。3.DFCs ALP活性检测结果:共培养第7天、14天,共培养组DFCsALP活性均>单独培养组DFCs(P<0.05)。4.FQ-PCR检测DFCs成骨基因表达:与BMSCs共培养10天,共培养组OCN、COL-I、BSP、Runx2基因相对表达量均>对照组(P<0.05)。结论:与BMSCs共培养可以增强DFCs增殖活力、ALP活性,及上调成骨基因OCN、COL-I、BSP、Runx2表达。DFCs、BMSCs复合培养在牙周组织缺损修复再生研究中具有潜在的应用价值。