补肾法及大豆异黄酮对乳腺癌基因组信号转导通路辅调节因子影响的实验研究

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本文研究了补肾法及大豆异黄酮对雌激素受体阳性乳腺癌MCF-7细胞及乳腺癌组织的作用,探讨药物作用于乳腺癌细胞后的基因组效应通路信号转导(genomicpathway)机制,为临床乳腺癌内分泌治疗提供新的药物靶点及使用剂量,为进一步开发用于防治乳腺癌的中药提供理论及实验基础。 方法:本研究选择国内建株的人乳腺癌雌激素受体阳性MCF-7细胞为实验对象,以不同剂量大豆异黄酮、左归饮、右归饮作为处理因素,通过体内、体外两种手段,采用MTT法、流式细胞仪分析、逆转录聚合酶链式反应等实验方法,从细胞增殖抑制、细胞周期变化、辅激活因子mRNA、辅抑制因子mRNA的表达、肿瘤生长抑制等方面进行了研究。 结果:①10-2g/L左归饮注射液及右归饮注射液对MCF-7细胞的影响:与空白对照组相比,10-2g/L左归饮注射液及右归饮注射液可显著抑制MCF-7细胞的增殖,P<0.05;②大豆异黄酮对雌激素受体阳性乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响:小剂量大豆异黄酮(10-6g/L、10-7g/L)作用后引起MCF-7细胞增殖;中剂量大豆异黄酮(10-4g/L、10-5g/L)对MCF-7乳腺癌细胞株增殖无明显影响;大剂量大豆异黄酮(10-2g/L、10-3g/L)作用后引起MCF-7细胞增殖被抑制;③大剂量大豆异黄酮及左归饮、右归饮对MCF-7细胞的CBP/P300、SRC1、SMRTmRNA表达的影响:大剂量大豆异黄酮及左归饮、右归饮对MCF-7细胞的CBP/P300、SRC1mRNA的表达有下调作用,而对SMRTmRNA的表达有上调作用;④药物对细胞凋亡的影响:各组药物对细胞的凋亡无明显影响;⑤大剂量大豆异黄酮及左归饮、右归饮对细胞周期的影响:大剂量大豆异黄酮及左归饮、右归饮可减少进入S期的MCF-7细胞的比例。⑥各浓度大豆异黄酮对子宫重量的影响:与生理盐水组相比,各浓度大豆异黄酮对子宫重量无显著性影响(P>0.05)。 结论:①补肾阴及补肾阳法对雌激素受体阳性乳腺癌均有抑制作用;②大豆主要成分大豆异黄酮根据浓度的不同对雌激素受体阳性乳腺癌具有双向调节作用,高剂量时对雌激素受体阳性乳腺癌亦有抑制作用;③补肾法抑制雌激素受体阳性乳腺癌增殖的机理可能在于下调乳腺癌CBP/P300,SRC1mRNA的表达,上调SMRTmRNA的表达,以此减少基因组信号转导通路信号下传;④补肾法抑制乳腺癌细胞生长的机制不在于引起细胞凋亡而可能在于其可减少进入S期的细胞比例。
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