土壤主要有机磷对禾谷镰刀菌生长、产毒以及致病力的影响

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong547
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禾谷镰刀菌是引起玉米茎腐病等常见土传病害的主要致病菌,对玉米的产量和品质造成严重影响。近些年来,随着气候环境、耕作方式和施肥制度的改变使我国玉米茎腐病的发病率呈上升趋势,特别是施肥制度的改变,肥料的大量施用使耕地地力不断提升的同时,也造成了茎腐病的病情逐年加重。为阐明耕地地力因素中土壤有机磷与病害发生的关系,运用真菌毒素快速检测技术以及盆栽和大田接种试验等研究方法,研究发现随着有机磷含量的升高,禾谷镰刀菌的生长、产毒以及致病力均显著提升,使玉米茎腐病等土传病害的病情加重。本研究选用吉林农业大学微生物实验室提供的禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)。分别设置卵磷脂、植酸和K2HPO4为查彼克培养基中的唯一磷源物质,具体设计原则为:每100 ml培养基中K2HPO4的添加量分别设置为1 mg、10 mg、100 mg、1000 mg。将培养基中K2HPO4替换为等物质的量的卵磷脂和植酸,经计算卵磷脂添加量对应为4.5 mg、45 mg、450 mg、4500 mg,植酸添加量对应为0.75 mg、7.5 mg、75 mg、750 mg。培养结束后比较不同磷源对禾谷镰刀菌生长、产毒以及致病力的影响差异,并对试验结果做出初步分析,本文主要研究结果如下:1、禾谷镰刀菌分别以卵磷脂,植酸,K2HPO4为唯一磷源,在查彼克固体培养基中进行培养,以不添加任何磷源的查彼克培养基作为对照,采用十字交叉法每天同一时间测定禾谷镰刀菌菌落直径的变化情况。测定结果表明,与对照组相比,三种磷源均能促进禾谷镰刀菌生长。其中,卵磷脂组菌落生长速度最快,当每100 ml培养基中卵磷脂添加量为450 mg时,在培养第6天菌落直径就达到8.5 cm。植酸和K2HPO4对菌落生长促进效果无差异,但都不如卵磷脂。液体摇床培养试验结果与平板试验结果一致,添加卵磷脂的液体培养基中菌丝干重明显高于其他两组(P<0.05)。菌丝干重最高可达0.28 g·L-1。两组试验结果都表明,卵磷脂能显著促进禾谷镰刀菌的生长。2、玉米种子的生测试验和发酵培养液中DON毒素的测定试验结果显示,添加卵磷脂和植酸两种有机磷的发酵培养液对玉米种子的萌发、胚根胚芽的生长具有明显的抑制作用,当每100 ml培养基中卵磷脂添加量为4500 mg时,发酵培养液对玉米种子的萌发抑制率可达56.7%,对胚根、胚芽的抑制率高达95.03%和89.49%,而K2HPO4组对种子萌发抑制率仅为16.7%,对胚根、胚芽的抑制率为75.76%和70.56%。植酸和卵磷脂的抑制效果明显强于K2HPO4(P<0.05)。对玉米种子的生长抑制效果随磷源添加量的增多而变得更加明显。而且,发酵培养液中DON毒素检测结果证明,毒素含量也随着卵磷脂和植酸的添加量增多而增多。当每100 ml培养基中植酸添加量为0.75 mg时,发酵培养液中毒素含量仅为69.87μg·L-1,当添加量设置为750 mg时毒素含量可达到580.79μg·L-1。发酵培养液的DON毒素测定结果表明,两种土壤主要有机磷与K2HPO4相比能显著促进禾谷镰刀菌产生更多的DON毒素(P<0.05)。3、在玉米苗期和吐丝期接种不同磷源培养条件下的禾谷镰刀菌,调查统计病害发生情况,依照病级评价标准和病情指数,比较致病力的强弱。结果表明,禾谷镰刀菌在添加有机磷的培养条件下,致病力明显强于K2HPO4(P<0.05)。当每100 ml培养基中卵磷脂添加量为4500 mg时,玉米苗期根部的发病率为100%,病情指数为95,玉米苗期茎部的发病率为98.33%,病情指数为94.55;当每100 ml培养基中植酸添加量为750 mg时,植酸苗期根部发病率为100%,病情指数为85。植酸茎部发病率为90%,病情指数为89.60。当每100 ml培养基中K2HPO4添加量为1000 mg时,K2HPO4苗期根部的发病率为86.67%,病情指数为56.67,苗期茎部发病率为76.66%,病情指数为72.41。玉米吐丝期试验结果与苗期试验结果一致,证明了卵磷脂和植酸这两种土壤主要有机磷与K2HPO4相比均能显著提升禾谷镰刀菌的致病力。
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