【摘 要】
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在基础科研和实际应用中,各种检测技术十分重要且被广泛使用,它们都有各自突出的优势以及适合使用的场景。本研究针对两种对象分别构建了所适用的检测方法:1)建立了一种高灵敏度和特异性的定量检测小鼠白细胞介素-17（Mouse interleukin-17,mIL-17）的双抗体夹心酶联免疫吸附测定（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）,可用于mIL-17相关炎
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在基础科研和实际应用中,各种检测技术十分重要且被广泛使用,它们都有各自突出的优势以及适合使用的场景。本研究针对两种对象分别构建了所适用的检测方法:1)建立了一种高灵敏度和特异性的定量检测小鼠白细胞介素-17（Mouse interleukin-17,mIL-17）的双抗体夹心酶联免疫吸附测定（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）,可用于mIL-17相关炎症性疾病的研究。具体结论如下:通过大肠杆菌表达系统获得mIL-17蛋白。通过对小鼠、兔子进行免疫,获得7株特异性的鼠单抗（1E4、2B2、2D8、3A9、3C4、5F6、5G1）和兔多抗。建立了以3C4、兔多抗作为捕获抗体和检测抗体,辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase,HRP）标记的羊抗兔Ig G进行信号放大的单多抗夹心ELISA。该方法的检测限为9.80 pg/m L（S/N=2）,检测范围为15.60–1000 pg/m L（R2=0.9817）。本方法具有特异性好（与小鼠IL-1β、IL-6、IL-12p40、IL-18、GM-CSF和TNF-α均无交叉反应）、重复性佳（批内变异系数为0.46%–7.04%,批间变异系数为0.34%–7.74%）的优点,满足了对低浓度mIL-17（10 pg/m L）检测的要求。2)开发了一种快速、定性检测转基因农作物中杀虫蛋白Cry1Ab的胶体金试纸条方法,可用于田间转基因作物的快速检测。具体结论如下:通过Cry1Ab蛋白对小鼠进行免疫,细胞融合等技术获得2株针对Cry1Ab不同表位的单抗,分别为1F11和3H6。设计了以金标3H6作为捕获抗体,分别固定1F11、羊抗小鼠Ig G于检测（Test,T）线和质控（Control,C）线的胶体金试纸条检测系统。本方法在15 min内可以完成对Cry1Ab的检测,检测限为60 ng/m L。
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