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目的： 探索影响大鼠海马神经元细胞培养过程的关键因素，以获得最大地细胞产出量并维持较长的培养时间。提取少突胶质膜蛋白，观察其对海马神经元轴突的影响。 方法： 本实验分为两部分： 1.选取24h内新生的SD大鼠，通过对多聚赖氨酸浓度、阿糖胞苷浓度，细胞接种密度和芍药苷添加对神经元培养过程的影响，研究神经元最优的提取和维持培养的流程。各因素的影响根据实际情况进行分组，并以最终的神经元细胞产出量和培养天数为观察指标。 2.通过各种培养基诱导成功培养少突胶质细胞，并采用免疫荧光鉴定。选用膜蛋白提取试剂盒提取少突胶质膜蛋白。将神经元细胞随机分为三组：对照组、少突膜蛋白提取物组和少突膜蛋白提取物加抑制剂Y27632组，在海马神经元细胞培养3天时加入膜蛋白提取物1mg/ml和Y2763250μM，观察光镜下其细胞形态变化，继续观察4天后对细胞进行免疫荧光染色，对比海马神经元轴突的变化。 结果： 1.多聚赖氨酸浓度在35μg/ml时，海马神经元细胞的生长状态最好。 2.神经元接种密度在4×104/cm2~8×104/cm2之间，所培养出成熟神经元数量是最多的。 3.阿糖胞苷在海马神经元细胞接种24h后添加2μmol/L，维持3天后半量换液，可以最大程度上的降低胶质细胞的数量。 4.芍药苷在海马神经元细胞接种24h后加入，维持每3天添加一次，直至细胞凋亡，加药组细胞培养周期为12.44±0.50天，对照组的细胞培养周期为11.67±0.33天，P>0.05，两组之间无统计学差异。 5.少突胶质膜蛋白提取物能够导致海马神经元细胞肿胀，轴突停止生长，其中对照组轴突长度为185.4±63.3mm，少突膜蛋白提取物组轴突的长度为37±10.4mm，少突膜蛋白提取物加抑制剂组轴突长度为127.6±29.3mm。 结论： 包被盖玻片的多聚赖氨酸浓度为35μg/ml，神经元接种密度在4×104/cm2~8×104/cm2之间，阿糖胞苷的工作浓度为2μmol/L时，可以获得最大的细胞产出量。芍药苷并不能显著提高海马神经元的培养周期。少突胶质膜蛋白提取物可以明显的抑制神经元细胞轴突的生长和延伸。