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背景：PTPN12是一种新型磷酸酯酶，其作为一种抑癌分子备受研究者的关注，我室与华中科技大学合作的一项前期研究发现了PTPN12遗传变异rs3750050-G导致PTPN12氨基酸序列第573位苏氨酸置换为甘氨酸(T573A)，且与中国人群罹患结直肠癌(CRC)的风险增加显著相关，但具体机制不明。
目的：本研究旨在探讨PTPN12在结直肠癌组织及癌旁组织中表达是否存在差异，并揭示PTPN12及其遗传变异T573A影响CRC增殖的分子机制。
方法：收集2017年1月至2019年12月期间40例我院行手术治疗的原发结直肠癌患者的肿瘤组织及对应癌旁组织标本，通过免疫组化染色分析PTPN12在癌、癌旁组织中的定位与表达，并使用Image-ProPlus6.0软件对结果进行半定量分析，使用SPSS22.0软件进行数据统计。将PTPN12及突变体T573A的表达质粒分别瞬时转染人结直肠癌SW480细胞，通过CCK-8实验、caspase-3活性检测、流式细胞术，分析PTPN12及其突变体PTPN12-T573A对该细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。使用IGF-1激活RAS/RAF/MEK/ERK通路，通过免疫印迹实验检测PTPN12及其突变体PTPN12-T573A对节点分子p52SHC及ERK磷酸化水平的影响；通过定量RT-PCR技术检测对ERK通路下游细胞周期调控分子CCND1表达的影响。
结果：1.通过免疫组化实验发现PTPN12在癌及癌旁肠组织中均有表达，主要表达于间质免疫细胞及肠粘膜上皮细胞的胞浆中；2.对免疫组化结果进行半定量分析发现，在36对结直肠癌肿瘤及癌旁组织中，PTPN12在肿瘤组织中的表达相较癌旁组织下降约24％(P＝0.002)；3.PTPN12能显著抑制SW480细胞增殖，而遗传变异T573A削弱了其抑制作用；4.过表达PTPN12及突变体PTPN12-T573A对SW480皆无明显促凋亡作用；5、PTPN12过表达导致SW480细胞阻滞在G0/G1期，而突变体PTPN12-T573A对SW480细胞周期无明显阻滞作用；6.PTPN12能显著抑制IGF1诱导的ERK及SHC激活，遗传变异T573A削弱其抑制作用；7.PTPN12过表达能抑制G1/S转化调控基因CCND1的表达，突变体PTPN12-T573A对CCND1表达无明显抑制作用。
结论：PTPN12广泛表达于结直肠癌组织及正常肠组织，且正常肠组织表达显著高于肿瘤组织。遗传变异T573A削弱了PTPN12对RAS/RAF/MEK/ERK通路的抑制，上调了下游CCND1基因的表达，加速了结直肠癌细胞G1/S转换，进而促进细胞增殖，最终影响了CRC发病风险。
目的：本研究旨在探讨PTPN12在结直肠癌组织及癌旁组织中表达是否存在差异，并揭示PTPN12及其遗传变异T573A影响CRC增殖的分子机制。
方法：收集2017年1月至2019年12月期间40例我院行手术治疗的原发结直肠癌患者的肿瘤组织及对应癌旁组织标本，通过免疫组化染色分析PTPN12在癌、癌旁组织中的定位与表达，并使用Image-ProPlus6.0软件对结果进行半定量分析，使用SPSS22.0软件进行数据统计。将PTPN12及突变体T573A的表达质粒分别瞬时转染人结直肠癌SW480细胞，通过CCK-8实验、caspase-3活性检测、流式细胞术，分析PTPN12及其突变体PTPN12-T573A对该细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。使用IGF-1激活RAS/RAF/MEK/ERK通路，通过免疫印迹实验检测PTPN12及其突变体PTPN12-T573A对节点分子p52SHC及ERK磷酸化水平的影响；通过定量RT-PCR技术检测对ERK通路下游细胞周期调控分子CCND1表达的影响。
结果：1.通过免疫组化实验发现PTPN12在癌及癌旁肠组织中均有表达，主要表达于间质免疫细胞及肠粘膜上皮细胞的胞浆中；2.对免疫组化结果进行半定量分析发现，在36对结直肠癌肿瘤及癌旁组织中，PTPN12在肿瘤组织中的表达相较癌旁组织下降约24％(P＝0.002)；3.PTPN12能显著抑制SW480细胞增殖，而遗传变异T573A削弱了其抑制作用；4.过表达PTPN12及突变体PTPN12-T573A对SW480皆无明显促凋亡作用；5、PTPN12过表达导致SW480细胞阻滞在G0/G1期，而突变体PTPN12-T573A对SW480细胞周期无明显阻滞作用；6.PTPN12能显著抑制IGF1诱导的ERK及SHC激活，遗传变异T573A削弱其抑制作用；7.PTPN12过表达能抑制G1/S转化调控基因CCND1的表达，突变体PTPN12-T573A对CCND1表达无明显抑制作用。
结论：PTPN12广泛表达于结直肠癌组织及正常肠组织，且正常肠组织表达显著高于肿瘤组织。遗传变异T573A削弱了PTPN12对RAS/RAF/MEK/ERK通路的抑制，上调了下游CCND1基因的表达，加速了结直肠癌细胞G1/S转换，进而促进细胞增殖，最终影响了CRC发病风险。