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目的:观察泛素—蛋白酶体通路相关蛋白泛素、UCH-L1在大鼠实验性视网膜脱离(retinal detachment,RD)后视网膜内情况,探讨泛素—蛋白酶体通路在是否参与调控视网膜脱离后细胞凋亡的发生。
方法: Wistar大鼠84只(84只眼),分成空白对照组、网脱组及泛素—蛋白酶体通路抑制剂组,每组28只(28只眼),实验组和抑制剂组通过在视网膜下注射透明质酸钠建立视网膜脱离模型,造模后抑制剂组按照0.10mg?kg-1 每日腹腔注射蛋白酶体抑制剂MG132的DMSO溶液一次。在视网膜脱离后4d分别摘除左眼眼球,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测视网膜细胞凋亡;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测泛素(ubiquitin)、泛素羟基末端水解酶L1(UCH-L1)mRNA表达水平;应用免疫印迹法,检测ubiquitin、UCH-L1的蛋白表达水平。采用SPSS17.0统计学软件进行数据分析。
结果:网脱组与正常对照组相比ubiquitin、UCH-L1表达水平提高,抑制剂组与网脱组相比ubiquitin、UCH-L1表达水平下降,细胞凋亡增加。以上差异均有统计学意义。
结论:视网膜脱离发生后泛素—蛋白酶体通路活性提高,在视网膜细胞凋亡过程中起保护性作用,结合先前的研究,推测可能与内质网应激途径存在上下游关系。