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目的:观察柚皮素对去卵巢致骨质疏松性骨折大鼠骨密度、生物力学、影像学、组织学的作用,系统评价柚皮素对大鼠骨质疏松性骨折愈合的作用,并进一步观察柚皮素对骨质疏松性骨折大鼠OPG/RANKL/RANK系统的作用,初步探讨其作用机制。方法:1动物分组与给药雌性SD大鼠(60只),随机平均分为对照组(Control)、模型组(Model)、柚皮素低剂量组(Nar-L):35 mg/kg、柚皮素中剂量组(Nar-M):70 mg/kg、柚皮素高剂量组(Nar-H):140 mg/kg,按照大鼠体重10 ml/kg体积灌胃给药连续8周。对照组与模型组按照体重给以等体积的0.5%CMC-Na溶液。2模型制备大鼠卵巢去除手术:麻醉采用腹腔注射戊巴比妥钠,找到腋中线腰部肋下1cm左右,用碘酒和酒精依次消毒后,开始大鼠去除卵巢手术。将去卵巢手术后的大鼠常规饲养12周造成骨质疏松症大鼠,将骨质疏松症模型大鼠麻醉,暴露右侧股骨,用钢锯切断股骨,造成横行骨折,以顺行方式置入直径1.5mm克氏针,制备大鼠骨质疏松性骨折模型。3观察指标与检测方法3.1骨密度(BMD)检测:大鼠右侧股骨骨密度值采用双能X线骨密度仪测定。3.2放射学观察:双能X线摄片观察大鼠骨折线及其骨痂生长情况。3.3血液生化指标检测:麻醉后,腹主动脉取血,离心后,采用自动生化分析仪测定血清钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶水平(ACP)。3.4骨生物力学检测:采用万能材料试验机分别行术侧股骨三点弯曲实验,测量最大弯曲力、抗弯强度、断裂挠度、弹性段终点荷等生物力学参数。3.5组织学HE染色:取骨折处骨痂组织,固定处理后进行HE染色,显微镜下进行形态学观察。3.6opg、rankl和rankmrna的表达:采用rt-pcr检测。3.7opg、rankl和rank蛋白的表达:采用werstern-blot检测方法检测。结果:1各组血生化指标分析与对照组比较,模型组血清中ca、p水平明显下降(p<0.01),alp水平明显上升(p<0.01);与模型组比较,柚皮素中、高剂量组ca水平显著上升(p<0.01),柚皮素三个剂量组p水平均显著上升(p<0.01),而三个剂量剂组alp水平均显著下降(p<0.01),acp水平在各组无明显改变。2各组骨密度分析与对照组比较,模型组骨密度水平明显下降(p<0.01);与模型组比较,柚皮素中、高剂量组骨密度水平显著上升(p<0.01)。3各组骨生物力学指标分析与对照组比较,模型组骨中最大弯曲力、抗弯强度、断裂挠度、弹性段终点荷明显下降(p<0.01);与模型组比较,柚皮素三个剂量组最大弯曲力均显著上升(p<0.01),柚皮素高剂量组抗弯强度显著上升(p<0.01),柚皮素中、高剂量组断裂挠度、弹性段终点荷显著上升(p<0.01)。4双能x线摄片结果分析x线片显示与对照组比较,模型组显示有明显的骨折线,周围呈现明显的骨痂生长;与模型组x片比较,柚皮素组骨折端缝隙明显减少,高剂组骨痂体积减小,骨折愈合最为明显。5he染色组织学观察光学显微镜观察到,对照组有大量成熟骨小梁形成,骨小梁较粗且排列致密有序,数目较多,排列方向与主应力方向一致;模型组可见软骨性骨痂,少量成熟骨小梁细胞,骨小梁粗细不均且排列紊乱,与主应力方向不一致,互相交错成网状;柚皮素组与模型组比较,病理变化有明显改善,骨小梁较粗,数目增多,排列较有序。6各组大鼠股骨opg、rankl、rankmrna表达情况与对照组比较,模型组股骨opgmrna表达明显下降(p<0.01),rankl、rankmrna表达明显上升(p<0.01);与模型组相比,柚皮素组三个剂量组opgmrna表达明显上升(p<0.01),柚皮素三个剂量组rankl和rankmrna表达明显下降(p<0.01)。7各组大鼠股骨opg、rankl、rank蛋白表达的变化与对照组比,模型组股骨OPG蛋白表达明显下降(P<0.01),RANKL、RANK蛋白表达明显上升(P<0.01);与模型组相比,柚皮素组中、高剂量组OPG蛋白表达明显上调(P<0.01),柚皮素组高剂量组RANKL蛋白表达明显下降(P<0.05),柚皮素组中、高剂量组RANKL蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论:柚皮素对去卵巢大鼠骨质疏松性骨折有促进骨折愈合的作用,与调节OPG/RANKL/RANK系统有关。