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目的：应用体外实验从基因和蛋白质水平研究反义microRNA-129在抑制喉癌细胞中miR-129表达，以及诱导喉鳞状细胞癌凋亡中的作用，以期待此研究能进一步阐明抑制microRNA-129在喉癌发生发展中的作用机制，为有效选择有利患者生活质量的治疗手段提供理论基础。 方法：应用Real-time PCR检测喉癌组织及邻近喉正常黏膜中miR-129的表达；利用喉癌Hep-2细胞做为实验细胞，将Hep-2细胞分为3组：反义寡聚核苷酸miR-129(AS-miR-129)组、喉癌细胞组及转染空白质粒组，用脂质体介导转染方法将反义寡聚核苷酸miR-129转染至喉癌Hep-2细胞，荧光倒置显微镜下观察转染情况；Real-time PCR方法检测miR-129的表达；Western-blot检测转染后Hep-2细胞中CDK4蛋白的表达；流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率。 结果：Real-time PCR对喉癌组织及邻近喉正常黏膜中miR-129检测发现miR-129在喉癌组织中表达显著高于黏膜组织(P<0.001)。利用脂质体介导技术向Hep-2细胞转染AS-miR-129，转染率为70％。Real-time PCR对三组细胞进行检测发现，AS-miR-129组、喉癌细胞组及转染空白质粒细胞组中miR-129表达具有统计差异，即AS-miR-129组Hep-2细胞中miR-129的表达水平明显低于喉癌细胞组及转染空白质粒组Hep-2细胞的miR-129的表达水平(P<0.001)，但喉癌细胞组与转染空白质粒细胞组中的miR-129的表达不具有显著性差异(P=0.32)。western-blot显示Hep-2细胞转染AS-miR-12948h后CDK4的表达量下降。流式细胞术检测发AS-miR-129组Hep-2细胞在G1期的凋亡增加。 结论：反义miR-129明显抑制Hep-2细胞中miR-129的表达，并可能通过下调CDK4的表达来诱导Hep-2细胞的凋亡。