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泛素—蛋白酶体途径（ubiquitin-proteasome pathway，UPP）不仅是一种破坏陈旧或损坏蛋白质的重要机制之一，而且还参与调节细胞周期进程、基因转录调节、受体胞吞、抗原呈递、细胞增生与分化以及信号转导等各种细胞生理过程，UPP的异常与诸多疾病有密切关系。酵母（S．cereviciae）蛋白Dcnlp参与了UPP途径中E3复合物SCF的Neddylation作用，并能促进此UPP途径底物的降解。本研究的内容包括：运用基因工程技术克隆Dcnlp蛋白基因至表达载体；运用原核表达技术获得表达大量可溶性的Dcnlp全长蛋白；经亲和层析、FPLC系统O柱及Sephadex G-200纯化全长蛋白；通过悬滴气象扩散法筛选蛋白晶体；在获知结构后，通过亲和层析和免疫印迹检测Dcnlp相互作用蛋白；采用表面等离子共振（SPR）进一步确定相互作用并获得结合常数。本研究的结论包括：1．获得了大量纯度达95％以上的Dcnlp蛋白；2．Dcnlp蛋白在100Mm Tris HCl（Ph8.5），30％PEGMME-5000，0.2M硫酸铵条件下获得了可用于数据收集并解析结构的晶体；3．在国内外首次获得Dcnlp蛋白晶体结构，分辨率为1.9A的晶体结构中包括第66—269位氨基酸残基的定位，符合正六面体空间排布，共由11个α—螺旋连接而成。4．在国内外首次提出并证实Rbxl同Dcnlp有弱相互作用，测得二者平衡结合常数KA=3.72×105M-1，进一步确定Dcnlp参与UPP以及Neddylaion途径，也为Dcnlp参与构成Neddylaion途径中E3复合物的推断提供了重要的新证据。本研究在结构分析的基础上探究Dcnlp的生物学功能，对Neddylation途径有了更为深入的了解，为泛素途径E3复合物SCF在细胞周期、有丝分裂中如何发挥作用提供新的依据和思路，对泛素途径相关的肿瘤、神经性疾病及炎症等疾病的研究具有重要的生物学意义。