一株新的海洋细菌及其灵菌红素产生条件和生物活性的研究

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该文研究了一株新的产灵菌红素(prodigiosin,PG)的海洋细菌--红色海杆菌(Rhodomarinobacter sp.)的生物学特性及其次级代谢产物一些性质.描述了该菌的形态特征、培养特征、生理生化特征,优化了该菌产生PG的发酵培养基和培养条件,并对其产生的PG进行了分离纯化,最后对PG的物化特性和抗菌性及对几种癌细胞凋亡作用进行了一系列的研究.结果表明,该红色海杆菌生长需要Na<+>,光照对菌体的生长和PG的产量有影响.该菌生长的温度范围为20℃~38℃,在20℃~23℃时菌体可产生蓝色物质,35℃~38℃时菌体为白色,产生灵菌红素最适生长温度为27℃.对该菌株产生的次生代谢产物对肿瘤细胞生长的影响进行了研究.用MTT法测得PG对人胃腺癌细胞MCG803的IC<,50>为0.62μ g/mi,对人肝癌细胞BEL7402的IC<,50>为0.45 μg/m1.5 μg/ml的PG处理MCG803细胞24h,用Hoechest33258染色,观察到典型的凋亡核形态;通过单细胞凝胶电泳(彗星电泳),观察到MCG803凋亡细胞基因组的降解.用2.5及5 μ g/ml的PG处理MCG803细胞24h,经流式细胞仪分析,凋亡细胞比率由未经化合物处理时的4.2%上升到14.5%和20.6%.鉴于2.5 μ g/mlPG处理MCG803仅24h,绝大部分细胞已溶胀破裂死亡,故初步判断PG对MCG803的细胞毒性作用,诱导凋亡不是其主要的方式.PG的作用还能导致MCG803周期细胞比例的改变.从该菌株代谢物分离得到的蓝色物质对MCG803的IC<,50>为4.6 μ g/mi,对BEL7402的IC<,50>为6.8 μ g/mi.10 μg/mi的蓝色物质处理的MCG803细胞,24h后即可观察到典型的凋亡核形态及基因组的降解.用5,10,20 μ g/mi的蓝色物质处理MCG803细胞24h,其凋亡细胞比例由未经处理的4.2%上升到10.1%,63.4%,70.7%.因此初步判断,诱导肿瘤细胞凋亡(apoptosis)是其发挥细胞毒作用的主要方式.蓝色物质的作用还能导致MCG803周期细胞比例的改变.
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