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对虾白斑综合征病毒基因表达图谱的构建及克氏原螯虾免疫相关基因的研究应用该实验室建立的对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)动物研究模型克氏原螯虾(Procambarus clarkii,以下简称螯虾)为研究对象,以抑制性差减杂交技术(supperssion subtractive hybridization,SSH)结合基因芯片技术,对WSSV的基因表达图谱及螯虾的免疫相关基因开展了研究.并用DotNorthem blot对部分基因进行了进一步验证,采用快速扩增末端技术(rapid amplification of cDNA end,RACE)对3个基因的全长进行了分析.1利用SSH技术分离WSSV表达基因及螯虾免疫相关基因以螯虾做为WSSV的增殖模型,分别以人工接种WSSV的试验组为检测组(tester)、接种PBS的对照组为驱逐组(driver),进行正向抑制性差减杂交;以对照组为tester、试验组为driver,进行反向SSH.2用eDNA芯片鉴定WSSV表达基因和螯虾免疫相关基因以螯虾为动物模型增殖WSSV,采用抑制性差减杂交技术构建差减克隆2020个,经PCR扩增.3阳性克隆的测序分析利用Pinpoint载体上的测序引物,对分离的201个阳性克隆进行了测序,测序结果通过以BLAST与GenBank中序列进行比对,共得到WSSV基因30个,其中该研究首次鉴定的有5个,有3个被其他研究判定无polyA结构的阅读框,经该研究证实其mRNA有polyA结构.4用Dot Northern blot鉴定eDNA芯片检出的WSSV及螯虾若干基因.5 WSSV某一全长eDNA的分析.6螯虾丝氨酸蛋白酶抑制物的基因分析.7螯虾70KD热休克蛋白同类物的基因分析.8.人工感染WSSV原螯虾的康复.提示在低温环境中不利于病毒的存活,螯虾对病毒的抗性存在个体差异,显示了开展对虾抗性选育工作的可行性.