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Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)，作为疱疹病毒家族的成员之一，是一种大型、有包膜的双链DNA病毒。HSV-2主要感染人的上皮细胞，是生殖器疱疹的主要致病病原。作为一个流行性非常广的人类病毒，HSV-2可以在机体骶神经节内建立终生潜伏感染，导致世界范围内约16％的成人携带HSV-2。由于HSV-2和HIV-1的共感染现象非常普遍，且HSV-2的感染能促进HIV-1的感染并能加速艾滋病的发病进程，HSV-2对人类生命健康构成了极大的威胁。HSV的感染和扩散是由糖蛋白gB，gD，gH和gL共同介导，四者缺一不可，其中gB在整个疱疹病毒家族中高度保守，并且在HSV-1和HSV-2的入侵中可以相互替代。gB不仅可以通过促进膜融合来介导病毒感染，还可以通过结合宿主细胞上的HSPG或DC-SIGN介导病毒的吸附。HSV-1 gB还被发现能与宿主细胞上特异受体相互作用介导病毒入侵，尽管目前还没有发现HSV-2 gB的特异受体，但HSV-1 gB受体的发现提示了HSV-2 gB受体的存在。鉴于gB在HSV感染中的重要性，gB在病毒入侵中的作用、gB的功能域和关键氨基酸等被广泛的研究。然而作为一个有七个潜在糖基化位点的糖蛋白，HSV-2 gB上N-糖链的作用很少受到关注。很多病毒糖蛋白，比如HIV-1的gp120和gp41以及流感病毒的HA，被报道某些位点的糖基化修饰被阻断可以影响蛋白的表达或者蛋白的功能，进而影响病毒的感染性和成熟病毒粒子的产生。此外病毒包膜相关的N-糖链能影响病毒的毒力、蛋白的抗原性及病毒对糖基结合药物的敏感性，同时在病毒免疫逃逸中起作用。尽管以往的文献曾报道，当糖基化抑制剂存在时HSV-1 gB在感染细胞细胞膜上的表达几乎检测不到，但是目前仍然没有关于HSV-1和HSV-2 gB糖基化重要性的研究。 本研究通过定点突变技术构建糖基突变子，首次对gB的糖基修饰状态以及糖基缺失突变对gB的表达、功能和生物活性的影响进行了系统地分析。结果显示，在gB七个潜在的糖基化位点中，除N470位点外其他六个位点在gB表达中是经过糖基化修饰的;其中N133位点的突变将阻断蛋白从内质网到高尔基体的转运，从而影响gB的表达成熟和感染性病毒粒子的产生;N79位点的突变可以少量地降低gB在细胞膜上的表达量;N422位点的突变对gB的表达和功能没有影响;N390、N483和N668位点的突变降低gB介导的细胞融合和病毒入侵的能力。此外，N390和N668位点的糖链缺失后病毒对糖基结合药物CV-N和GRFT的敏感性将变弱，并且N390、N422、N483和N668位点糖链缺失后病毒对gB抗血清的敏感性变强。总之，本课题的实验结果表明N-连糖基化对HSV-2gB的表达成熟至关重要，N-糖链参与了gB介导的细胞融合和病毒入侵，并且能影响gB的生物活性，进一步突出了HSV-2 gB上N-糖链的重要性。