论文部分内容阅读
对人类威胁较大的病毒绝大多数是有包膜的病毒，如:SARS冠状病毒、流感病毒、埃博拉病毒、登革热病毒等。其中，流感病毒感染严重威胁人类健康并带来巨大的经济损失。流感病毒快速的变异能力以及高致病性禽流感的爆发，使得开发新型抗流感病毒药物意义重大。本实验室前期研究发现FDP对流感病毒等包膜病毒具有广谱的杀病毒活性。在此基础上，本研究以流感病毒为代表，研究了FDP的详细杀病毒机制。 本文第一部分内容是引言。首先简要介绍了流感病毒的结构、基因组和生活周期等。然后，简要介绍了1，6-二磷酸果糖(FDP)的结构。阐述了FDP作为代谢中间产物的功能以及作为药物在临床中的应用。最后，介绍了本研究的目的，内容和意义。 本文第二部分是对FDP的杀病毒谱评价和杀病毒机制研究。首先通过检测FDP的杀病毒谱，发现FDP对不同病毒科的包膜病毒具有剂量依赖的杀病毒作用，而对无包膜病毒却没有杀病毒作用，说明FDP对有包膜的病毒具有广谱的灭活作用，推测FDP的杀病毒作用与病毒包膜相关。以流感病毒为模式病毒，我们对FDP的杀病毒机制进行了研究。结果发现FDP灭活的流感病毒在不同的细胞系和鸡胚上都不能复制，并且FDP的杀病毒作用不依赖于流感病毒的基因型。FDP杀病毒作用动力学分析提示，FDP的杀病毒作用是依赖于时间和温度的。温度会影响膜的流动性，因此推测FDP杀病毒作用与病毒包膜相关，与前面的推测是一致的。类似的，基于病毒生活周期的特点，我们探讨了FDP灭活后的流感病毒复制受损阶段。通过间接免疫荧光实验，发现FDP灭活后的流感病毒仍能正常吸附进入细胞，完成酸化过程。通过染料标记的膜融合实验，证明FDP灭活后的流感病毒不能完成与细胞膜的融合。之后，从病毒的结构入手，我们检测了FDP对流感病毒表面两个包膜蛋白（HA和NA）结构和功能的影响。结果显示FDP没有与HA和NA发生结合，同时也没有抑制HA和NA的功能。接下来，直接检测了FDP对病毒脂膜的影响。通过RNA保护实验和脂质体转染实验，证实FDP可以破坏病毒膜的完整性。综上所述，FDP的杀病毒作用是通过破坏病毒包膜的完整性进而使病毒失去感染性。 本文第三部分归纳总结了本研究的结论。本研究表明:FDP对多种包膜病毒具有广谱的杀病毒作用，可将FDP用于个人卫生、家庭用具以及外界环境等的消毒，具有广阔的应用价值。