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背景糖尿病足是糖尿病病情发展过程中一个极其严重的并发症,目前我国糖尿病的发病率约为10.6%,而约25%的DM患者会在疾病发展的过程中并发足部的感染、溃疡及坏疽。目前已有的内外科治疗手段疗效欠佳,糖尿病足患者往往不得不截肢以阻止病情的进一步发展和恶化。同时,糖尿病足复发率高,在一些中低收入的发展中国家,糖尿病足患者往往面临着创面迁延不愈,医疗费用支出增加,甚至危及生命的现状。胫骨横向骨搬移术是基于Ilizarov技术“张力-应力”法则下开发出的用于治疗下肢慢性缺血性疾病的疗法,被我们首先应用于重度糖尿病足患者以促进其创面愈合,降低患者截肢的风险,取得了良好的治疗效果,患者创面能在较短的时间内愈合。但是其促进创面愈合的机制尚不明确。巨噬细胞是参与机体炎症反应的重要细胞,其在不同环境因素刺激下可转化为表达不同细胞表型和不同功能的细胞亚群,称之为巨噬细胞的极化。巨噬细胞主要极化为M1和M2两种类型的巨噬细胞,前者在炎症反应期可分泌多种促炎因子以杀灭病原微生物,控制感染,但同时可造成对自身组织的损伤;后者在炎症增殖期分泌多种抗炎和生长因子以调节免疫反应,促进组织损伤的修复。作为皮肤组织的特异性干细胞,表皮干细胞不仅维持着皮肤正常新陈代谢,也是皮肤组织和皮肤附属器发生、修复和改建的关键,促进表皮干细胞的增殖与分化,会使创面由解剖修复向功能修复成为可能。我们认为重度糖尿病足患者创面处由于病原微生物持续存在,导致巨噬细胞极化失衡,巨噬细胞主要极化为M1型巨噬细胞而M2型巨噬细胞相对匮乏,同时表皮干细胞的功能受到抑制,因而创面迁延不愈。而胫骨横向骨搬移术可促进巨噬细胞极化平衡的重建,促进巨噬细胞转化为M2型巨噬细胞,同时促进了表皮干细胞功能的恢复,使得创面处溃疡得以愈合。方法1、收集2014年7月~2017年6月在广西医科大学第一附属医院骨关节外科住院接受胫骨横向骨搬移术治疗的136例重度糖尿病足患者,统计其基本资料(年龄、性别、Wagner分级、糖尿病病程、糖尿病足病程等)、创面愈合平均时间、截肢率、1年内和3年内复发率,初步评估胫骨横向骨搬移术治疗重度糖尿病足疗效;同时有33例患者合并全身感染症状,对比其创面愈合时间与未合并全身感染症状患者创面愈合时间。2、征求患者同意后于术后1月取其创面愈合边缘处组织制成组织切片,行HE染色后镜下观察愈合情况,共10例。3、征求患者同意后于术前及术后1月取其创面边缘处组织制成组织切片,应用免疫组化技术,以CD86单抗标记M1型巨噬细胞,CD163单抗标记M2型巨噬细胞,染色后应用Image pro plus6.0软件对图像中的像素点进行采集分析,计算出M1/M2比值的变化,术前组与术后1月组各10例。4、应用免疫组化技术,以CK19标记表皮干细胞,检测手术前后Ki-67阳性细胞和CK19阳性细胞的分布,术前与术后1月组各5例。结果1、136例重度糖尿病足患者有6例因术后创面愈合不佳而截肢,截肢率4.4%;10例患者创面愈合后1年内溃疡复发,12例患者3年内溃疡复发,1年内和3年内复发率分别为7.7%和9.2%;创面的平均愈合时间为(3.8±2.4)个月;合并全身感染症状患者创面平均愈合时间为(5.3±2.7)个月,未合并全身感染症状患创面平均愈合时间为(3.3±2.1)个月,差异有统计学意义(P<0.05)。2、创面愈合处可观察到皮纹及一条线形疤痕,组织行HE染色后镜下可观察到表皮层和真皮层结构。3、术前组M1/M2平均值为4.072±0.502,术后1月组M1/M2平均值为3.098±0.548,应用SPSS22.0行独立样本t检验提示差异具有统计学意义(P<0.05)。4、术前Ki-67阳性细胞主要集中在表皮基底层细胞且只有一两层。术后Ki-67阳性细胞在表皮基底层处增厚,且在真皮层也有散在群性分布。CK19阳性细胞主要在真皮层发现,成管状或团状分布,术后较术前增多。结论1、胫骨横向骨搬移术可缩短糖尿病足创面愈合的时间,降低截肢率和复发率。2、创面愈合处组织经大体和HE染色后镜下均可观察到皮肤组织的基本特征,可初步证明胫骨横向骨搬移手术促进了重度糖尿病足创面处皮肤组织再生。3、胫骨横向骨搬移手术促进了巨噬细胞转化为M2型巨噬细胞,重建巨噬细胞极化的平衡,并促进了表皮干细胞功能的恢复,重度糖尿病足患者创面处溃疡得以愈合。