胰高血糖素样肽-2对脓毒症大鼠肠粘膜上皮间紧密连接蛋白表达及细菌移位的影响

来源 :蚌埠医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hyq20061001
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目的:探讨胰高血糖素样肽-2(glucagon like peptide-2, GLP-2)对脓毒症大鼠肠粘膜上皮间紧密连接蛋白表达及细菌移位的影响。  方法:健康成年雄性Sprague Dawley大鼠60只,体重250-280g,随机分为3组,A组:生理盐水对照组,B组:内毒素(lipopolysaccharide, LPS)组, C组:LPS+GLP-2组。分别以生理盐水(1ml/kg)、EcolliO55:B5(5mg/kg)、GLP-2(250μg/kg)腹腔注射6h后处死动物,剖摘眼球取血紫外分光光度法检测D-乳酸含量,留取末端回肠组织用免疫组化法及western blot法检测occludin蛋白表达,肠系膜淋巴结、肝、肺组织匀浆后细菌培养计算细菌移位率,同时观察肠粘膜普通病理(H-E染色)及超微结构变化。  结果:1、光镜下A组肠粘膜未见明显病理改变。B组肠粘膜明显充血水肿,上皮细胞部分变性、坏死脱落,并有大量炎细胞浸润。C组肠粘膜病理改变较B组明显减轻。  2、电镜下A组肠微绒毛及细胞间紧密连接未见异常。B组上皮细胞连接增宽,微绒毛变细、稀疏,部分断裂、脱落,细胞器受损。C组改变较B组明显减轻。  3、B组血液中D-乳酸含量较A组升高,差异有显著性,8.14+0.91 vs3.98+0.68, P<0.001;C组D-乳酸含量较B组降低,差异有显著性,6.46+0.73 vs8.14+0.91,P<0.001,但较A组仍高,尚未恢复至正常。  4、A组紧密连接蛋白 occludin沿着细胞膜的顶端呈线状连续分布,B组occludin分布不均,染色变淡。免疫组化平均光密度值及western blot净光密度值结果可见:B组occludin表达明显低于A组,平均光密度值0.1906+0.0153 vs0.2237+0.0155,净光密度值205.12+19.46 vs267.00+21.76,P<0.001;C组occludin表达明显高于B组,平均光密度值0.2089+0.0152 vs0.1906+0.0153,净光密度值224.84+16.44 vs205.12+19.46,P<0.01。  5、肠系膜淋巴结、肝、肺器官细菌移位率水平 B组明显高于 A组(P<0.001),C组明显低于B组(P<0.001)。  结论:1、脓毒症大鼠肠粘膜上皮间紧密连接蛋白 occludin表达显著下降,细菌移位率显著升高。  2、应用GLP-2后,脓毒症大鼠肠粘膜上皮间紧密连接蛋白occludin表达显著升高,细菌移位率显著降低,提示GLP-2对对肠粘膜机械屏障具有保护作用。
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