微流控芯片提高生化检测效率

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微流控芯片(Microfluidics)由于其微尺度、小体积和短反应时间的特性,被广泛应用于各种生化分析;其中,微流控芯片中的免疫检测方法也一直备受关注。本论文对现有的微流控芯片免疫检测方法进行了综述,并针对检测中通量、灵敏度、反应时间和结果可视化四个方面进行改进和优化,提高了微流控芯片免疫检测效率。   (1)提高通量:在聚二甲基硅氧烷微流控芯片中进行免疫反应,通过交叉点阵的免疫检测方法提高通量,使用平行微管道的芯片,在垂直交叉的两个方向分别孵育抗原抗体条带,在交叉区域发生点阵免疫反应,我们优化了这个反应的参数,并且将其应用于针对多种抗原的HIV抗体检测相关研究。   (2)增加灵敏度:通过发展一种使用电纺聚偏氟乙烯薄膜(ESPVDF)为基底的微流控芯片,使用了思高透明胶带辅助的ESPVDF薄膜封接方法。由于高压静电纺丝薄膜由微纳米纤维组成,具有非常大的比表面积,可以吸附更大量的蛋白质,得到高灵敏度的检测结果。   (3)缩短反应时间:通过发展一种真空辅助的免疫反应方法,使用双层芯片夹聚碳酸酯滤膜,借助真空抽滤的作用,抗原溶液会快速通过滤膜,将抗原蛋白固定到交叉点阵处的滤膜上;抗体溶液也会同样快速通过滤膜与抗原发生免疫反应。抗原固定和抗原抗体免疫反应时间可以分别缩短到5分钟内完成,在缩短时间的同时有更低的检出限。   (4)结果可视化:将基于金纳米颗粒表面等离子激元的铜离子可视化检测反应集成到微流控芯片中,铜离子催化金纳米颗粒表面功能化基团发生反应,产生聚集,溶液发生从红到蓝的颜色变化;我们使用双层过滤微流控芯片,下层发生金纳米颗粒聚集反应,通过芯片的过滤作用在上层滤膜上形成清晰的彩色条带。   (5)微纳制备方法:使用排列的高压静电纺丝翻模得到微槽结构。高压静电电纺可以快速制备纺丝纤维,通过对电纺过程的控制可以得到不同直径和排列的纺丝纤维,使用胶带固定的方法对纺丝纤维进行翻模,可以得到不同尺寸和深度的微槽,以及由这些微槽组成的微结构。
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