【摘 要】
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植物胞质甘油醛三磷酸脱氢酶（cytosolic glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPC）在植物响应干旱等非生物胁迫中具有重要作用。植物GAPC应答非生物胁迫的机制研究发现,在盐、干旱、低温条件下GAPC可与一些胁迫诱导蛋白发生互作。本实验室前期研究,以中国春小麦为材料,通过实时荧光定量PCR（RT-q PCR）发现,Ta GAPC1基因（登录号:
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（No.31271625和No.31271609）； 黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点试验室专项项目（No.10502）；
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植物胞质甘油醛三磷酸脱氢酶（cytosolic glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPC）在植物响应干旱等非生物胁迫中具有重要作用。植物GAPC应答非生物胁迫的机制研究发现,在盐、干旱、低温条件下GAPC可与一些胁迫诱导蛋白发生互作。本实验室前期研究,以中国春小麦为材料,通过实时荧光定量PCR（RT-q PCR）发现,Ta GAPC1基因（登录号:KU246046.1）在盐、低温、高温、干旱胁迫下m RNA水平均上升,其中在干旱胁迫下上升最为显著,推测Ta GAPC1以某种方式参与小麦干旱胁迫应答。为了探索其参与干旱的应答机制,本试验通过酵母双杂交技术从小麦干旱c DNA文库中筛选其互作蛋白,旨在通过研究互作蛋白的功能来探索Ta GAPC1响应干旱等非生物胁迫的作用机制。试验结果如下:1.将小麦Ta GAPC1基因ORF、Gp＿dh＿C和Gp＿dh＿N结构域序列分别连接至p GBKT7载体,成功构建p GBKT7-Ta GAPC1ORF、p GBKT7-Ta GAPC1GpdhC、p GBKT7-Ta GAPC1GpdhN诱饵载体;通过毒性和自激活性检测表明,Ta GAPC1蛋白及Gp＿dh＿C和Gp＿dh＿N结构域均对Y2HGold菌无毒害作用,且均无自激活性;2.从中国春小麦干旱c DNA文库中,以Ta GAPC1蛋白及其催化结构域为诱饵初步筛选出14个Ta GAPC1互作蛋白。将部分互作蛋白通过酵母双杂交系统进行回转验证,结果表明,谷氨酸受体蛋白3.1、质体谷氨酰合成酶2、休眠相关同源蛋白3类似蛋白/生长素抑制蛋白、肌醇加氧酶均可与Ta GAPC1发生互作。
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