【摘 要】
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运用现代分子生物学技术,成功构建并表达CaM-mut-proinsulin融合基因,经过优化表达条件,在25℃,16h的条件下成功表达出可溶性的CaM-mut-proinsulin融合蛋白,经DEAE-FF层析柱
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运用现代分子生物学技术,成功构建并表达CaM-mut-proinsulin融合基因,经过优化表达条件,在25℃,16h的条件下成功表达出可溶性的CaM-mut-proinsulin融合蛋白,经DEAE-FF层析柱分离纯化CaM-mut-proinsulin融合蛋白,最后经过PSP酶切割,可获得高纯度的proinsulin mutant蛋白。对该融合蛋白及proinsulin mutant蛋白进行生理、生化性质方面的研究。质谱分析测定表明proinsulin mutant蛋白得到了较好地纯化,其中proinsulin mutant蛋白的分子量为7074 Da(理论值7069 Da)。抗血小板聚集测试研究表明,CaM-mut-proinsulin融合蛋白及proinsulin mutant蛋白均表现出明显的抑制活性。运用圆二色光谱技术对CaM-mut-proinsulin融合蛋白及proinsulin mutant蛋白进行了二级结构分布的研究。
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