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我国作为一个养殖大国，饲料总产量位居世界第一。然而我国的特殊国情所致，其饲料资源相对匮乏，利用生物技术提高常规饲料的利用率，并且开发一些非常规性饲料用于拓宽饲料资源，将是极为重要的。近年来，内切木聚糖酶已多被广泛应用于饲料、制浆造纸和食品工业等，本研究基于木聚糖酶的重要价值和开发前景的广阔性，成功地转化了多拷贝木聚糖酶基因的枯草芽孢杆菌WB800N表达宿主，采用固体发酵的形式，外分泌出了内切木聚糖酶，并且对该酶进行了初步的酶学性质分析。 整合载体pHT43/Spo0A是本试验需要构建的目的载体，是以pHT43质粒为基础，以Spo0A基因作为单交换的同源片段，利用限制性内切酶位点Kpn I插入，得到整合载体pHT43/Spo0A。 研究发现，为了减少过载的外源高拷贝木聚糖酶基因对宿主的生长代谢的影响，人工将xynT基因内的碳水化合物结合区敲除，经过亚克隆，成功构建单拷贝载体。利用Xho I与Sal I作为同尾酶的特性，成功构建了一个包含三拷贝串联表达盒的穿梭载体pHT43(+)/3（xynT_CBD）。再将该载体转化Bacillus subtilis WB800N获得包含三拷贝xynT_CBD基因的重组枯草芽孢杆菌，qPCR进一步验证其正确性。 通过IPTG诱导蛋白表达，经SDS-PAGE和WB验证其正确性，定性地验证在21KD大小的特异性蛋白条带为外源木聚糖酶蛋白；经Ni-NTA亲和层析柱纯化后，分析其酶学性质。