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食用菌中的麦角甾醇经紫外线照射后转化为维生素D2,可用于缓解维生素D缺乏现状,对人类健康具有重要意义.本论文建立了食用菌中维生素D2的检测方法及提取方法,探究了不同紫外线、不同部位对食用菌中维生素D2及麦角甾醇含量的影响,并结合气调、冷藏保鲜手段,探究了双孢蘑菇中维生素D2及麦角甾醇贮藏期内的变化规律.
采用超高效液相色谱-串联质谱技术,建立了食用菌中维生素D2的测定方法,优化后的仪器条件如下:加速电压选择120eV,定量子离子与定性子离子的碰撞电压分别选择22eV和12eV,色谱柱选择ZORBAXEclipseplusC18(2.1×150mm,3.5μm),流动相选择甲醇-水,其比例为95∶5(v/v).方法学考察结果表明,在1~40μg/mL浓度范围内,维生素D2的峰面积与其浓度线性关系良好,相关系数大于0.999,检出限为20.0μg/kg,定量限为60.0μg/kg.回收率为77.0%~92.5%,相对标准偏差(RSD)为2.1%~4.9%,方法准确可靠.
以短波紫外线(UV-C)照射后双孢蘑菇为实验材料,利用单因素实验确定的醇碱体积比,以液固比、皂化温度、皂化时间为自变量,维生素D2的提取量为响应值,采用响应面法分析研究各因素对维生素D2的提取量的影响,确定最佳工艺参数.结果表明,双孢蘑菇中维生素D2的最佳皂化工艺为醇碱体积比2∶1(mL/mL),液固比12∶1(mL/g),皂化温度75℃,皂化时间63min,此条件下,维生素D2提取量为8.13μg/g,与理论值相近,实验建立的皂化工艺切实可行.
紫外线波长对食用菌中维生素D2的生成有重要的影响.食用菌不同部位的维生素D2及麦角甾醇含量存在差异.中波紫外线(UV-B)、UV-C单独或组合照射食用菌四种照射方式均能使三种食用菌中的维生素D2含量显著增加,同一种照射方式下,平菇增加量最多,达到86.25μg/g,其次为香菇、双孢蘑菇.UV-B比UV-C及组合照射使食用菌产生了更多的维生素D2.紫外线照射后的双孢蘑菇菌柄与菌盖的维生素D2含量相差不大,菌褶中仅有较少维生素D2(0.57μg/g).双孢蘑菇各部位分开后照射维生素D2含量高于整体照射,对照组双孢蘑菇各部位的麦角甾醇含量由高到低为菌褶、菌盖、菌柄.双孢蘑菇冻干粉与冻干片相比维生素D2含量无显著差异,但均高于新鲜双孢蘑菇.
贮藏时间及保鲜措施影响双孢蘑菇中维生素D2及麦角甾醇含量的变化.结合气调保鲜手段,选取了0℃和4℃两个贮藏温度,比较了UV-C、UV-B照射后的双孢蘑菇在贮藏1、7、14天时,维生素D2及麦角甾醇含量及色度的变化.
维生素D2含量随着贮藏时间的延长而下降,0℃结合气调保鲜贮藏有利于维持双孢蘑菇中维生素D2稳定.麦角甾醇含量在贮藏期间呈现先增加后减少的趋势,UV-C照射后,4℃非气调的贮藏条件下麦角甾醇含量最高,其次为0℃非气调、4℃气调、0℃气调.随着贮藏时间的延长,双孢蘑菇表面逐渐发生褐变,L*值下降,贮藏初期,紫外照射后的双孢蘑菇L*值略低于对照组,延长贮藏时间,对照组的L*值下降幅度远大于紫外线处理的双孢蘑菇,UV-C处理在贮藏后期能有效抑制双孢蘑菇褐变.
采用超高效液相色谱-串联质谱技术,建立了食用菌中维生素D2的测定方法,优化后的仪器条件如下:加速电压选择120eV,定量子离子与定性子离子的碰撞电压分别选择22eV和12eV,色谱柱选择ZORBAXEclipseplusC18(2.1×150mm,3.5μm),流动相选择甲醇-水,其比例为95∶5(v/v).方法学考察结果表明,在1~40μg/mL浓度范围内,维生素D2的峰面积与其浓度线性关系良好,相关系数大于0.999,检出限为20.0μg/kg,定量限为60.0μg/kg.回收率为77.0%~92.5%,相对标准偏差(RSD)为2.1%~4.9%,方法准确可靠.
以短波紫外线(UV-C)照射后双孢蘑菇为实验材料,利用单因素实验确定的醇碱体积比,以液固比、皂化温度、皂化时间为自变量,维生素D2的提取量为响应值,采用响应面法分析研究各因素对维生素D2的提取量的影响,确定最佳工艺参数.结果表明,双孢蘑菇中维生素D2的最佳皂化工艺为醇碱体积比2∶1(mL/mL),液固比12∶1(mL/g),皂化温度75℃,皂化时间63min,此条件下,维生素D2提取量为8.13μg/g,与理论值相近,实验建立的皂化工艺切实可行.
紫外线波长对食用菌中维生素D2的生成有重要的影响.食用菌不同部位的维生素D2及麦角甾醇含量存在差异.中波紫外线(UV-B)、UV-C单独或组合照射食用菌四种照射方式均能使三种食用菌中的维生素D2含量显著增加,同一种照射方式下,平菇增加量最多,达到86.25μg/g,其次为香菇、双孢蘑菇.UV-B比UV-C及组合照射使食用菌产生了更多的维生素D2.紫外线照射后的双孢蘑菇菌柄与菌盖的维生素D2含量相差不大,菌褶中仅有较少维生素D2(0.57μg/g).双孢蘑菇各部位分开后照射维生素D2含量高于整体照射,对照组双孢蘑菇各部位的麦角甾醇含量由高到低为菌褶、菌盖、菌柄.双孢蘑菇冻干粉与冻干片相比维生素D2含量无显著差异,但均高于新鲜双孢蘑菇.
贮藏时间及保鲜措施影响双孢蘑菇中维生素D2及麦角甾醇含量的变化.结合气调保鲜手段,选取了0℃和4℃两个贮藏温度,比较了UV-C、UV-B照射后的双孢蘑菇在贮藏1、7、14天时,维生素D2及麦角甾醇含量及色度的变化.
维生素D2含量随着贮藏时间的延长而下降,0℃结合气调保鲜贮藏有利于维持双孢蘑菇中维生素D2稳定.麦角甾醇含量在贮藏期间呈现先增加后减少的趋势,UV-C照射后,4℃非气调的贮藏条件下麦角甾醇含量最高,其次为0℃非气调、4℃气调、0℃气调.随着贮藏时间的延长,双孢蘑菇表面逐渐发生褐变,L*值下降,贮藏初期,紫外照射后的双孢蘑菇L*值略低于对照组,延长贮藏时间,对照组的L*值下降幅度远大于紫外线处理的双孢蘑菇,UV-C处理在贮藏后期能有效抑制双孢蘑菇褐变.