【摘 要】
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目的：SuperfectTM是一种新型的纳米转染载体，其转染效率主要与DNA的剂量、N／P比（N：载体分子表面胺基的数量，P：DNA中磷酸基团的数量）、细胞类型和密度、细胞融汇（cell confluency）程度及
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目的：SuperfectTM是一种新型的纳米转染载体，其转染效率主要与DNA的剂量、N／P比（N：载体分子表面胺基的数量，P：DNA中磷酸基团的数量）、细胞类型和密度、细胞融汇（cell confluency）程度及载体与DNA形成的复合物与细胞共同孵育的时间等因素相关。本实验对其转染效率、最佳转染条件和细胞毒性进行初步的研究，探讨其在基因治疗领域的应用价值。 方法：以50％融汇率的小鼠黑色素瘤细胞为靶细胞，以增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1为导入基因。实验组：以不同的转染条件转染，即不同的质粒剂量（0.25ug，0.50ug）、不同的N／P比（2：1，5：1，10：1）及复合物与细胞的孵育时间（3h，6h）；对照组：分为裸质粒转染组、载体转染组，非转染组。流式细胞仪检测转染效率，MTT法检测细胞毒性。 结果：各实验组间的转染效率有显著性差异（P＜0.05），SuperfectTM在高N／P比及长时间与细胞孵育时表现出一定的细胞毒性。当质粒剂量为0.5ug，N／P比为5：1，复合物与细胞孵育3h时，SuperfectTM具有较高的转染活性，并表现出较低的细胞毒性（P＜0.05），而且在6天的观察时间内，荧光蛋白的表达量在转染后有随时间推移而逐渐增加的趋势。 结论：SuperfectTM是一种高效低毒的转染载体，其最佳转染条件和对细胞活性的影响主要与N／P比及复合物与细胞的孵育时间相关。荧光蛋白的持续表达提示其可以介导DNA稳定转染。SuperfectTM在基因治疗领域将具有良好的应用前景。
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