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DNA疫苗是HIV-1疫苗研究领域的一个研究重点。与传统疫苗相比，DNA疫苗具有安全性高、基因容量大、容易操作和生产等优势。然而，在大型灵长类动物模型和临床试验中，DNA疫苗诱导的免疫反应水平相对较低，其中重要的解决策略是提高抗原基因的表达效率和免疫原性。小环DNA是一种只含有外源基因表达盒的环状质粒DNA，与普通质粒相比，具有表达效率高、持续时间长、安全性高等优势，可以作为有效提高抗原基因表达效率的DNA疫苗载体。体内电穿孔技术输送DNA疫苗，可以有效提高抗原的表达水平以及抗原特异的免疫反应。本研究利用体内电穿孔技术输送小环DNA，以诱导更强的HIV-1抗原特异的体液免疫反应和细胞免疫反应。利用luciferase报告基因，首先比较了小环DNA与普通质粒DNA的表达效率，结果表明小环DNA能够在小鼠体内介导更快更强的外源基因表达。而体内电穿孔技术不但能够提高小环DNA介导的外源基因的表达水平，还能改变免疫位点局部的组织环境，激活NF-κB通路，上调炎性因子的表达，从而诱导炎症细胞的募集，起到免疫佐剂的作用。为了考察体内电穿孔技术输送的小环DNA所诱导的特异性免疫反应，利用该方法输送携带密码子优化的HIV-1 gag基因的小环DNA疫苗，ELISA和ELISPOT检测结果表明，体内电穿孔技术输送小环DNA疫苗能够提高小环DNA疫苗诱导的特异性免疫反应，有效降低免疫剂量。同时，与普通质粒DNA疫苗相比，小环DNA疫苗能够诱导更高水平的体液免疫反应和细胞免疫反应。本研究结果显示体内电穿孔技术联合小环DNA的疫苗输送系统具有高效的抗原基因表达和免疫佐剂的能力，能够有效提高HIV-1特异的免疫反应水平，这为该系统在DNA疫苗特别是HIV-1疫苗领域的应用提供了前期的理论基础和技术支持。