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尼可霉素是由圈卷产色链霉菌(Streptomyces ansochromogenes)和唐德链霉菌(S。tendae)产生的一类具有很强抗真菌活性的核苷肽类抗生素。由于它们在自然界中易降解,并且对人体、动物及植物等无毒,因此,尼可霉素在农业或医药上具有广阔的应用前景。本论文工作主要包括圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成相关基因sanT的功能研究。
sanT基因是圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因簇中的一个基因。序列分析表明,sanT编码的蛋白产物包含两个结构域:N-端的酰基载体蛋白(ACP)结构域和C-端的转氨酶(AMT)结构域。这样的结构并不常见。基因阻断和互补实验证明sanT是尼可霉素生物合成必不可少的。在大肠杆菌中表达并且纯化了SanT蛋白的每个结构域。ACP结构域的第33位丝氨酸翻译后修饰了磷酸泛酰巯基乙胺(Ppnt)。AMT结构域可以催化尼可霉素肽基部分前体4-吡啶-2-氧-4-羟-异戊酸(POHIV)转氨生成吡啶同型苏氨酸(PHT)。两个结构域独立起作用,但都是尼可霉素生物合成所必需的。生化和遗传数据表明:SanT有可能是双功能蛋白,参与尼可霉素肽基部分的合成以及尼可霉素的组装。