半乳糖凝集素-9及其受体Tim-3在小鼠病毒性心肌炎中的动态变化及意义

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目的检测病毒性心肌炎小鼠不同时间点外周血中半乳糖苷凝集素蛋白(Galectin-9,Gal-9)的含量及心肌组织中Gal-9 mRNA及其受体Tim-3 mRNA的表达,探讨Gal-9在病毒性心肌炎发生发展中的作用。方法选用58只5-6周龄健康雄性Balb/c小鼠,体重为16-18g,随机分为病毒组(n=50)和对照组(n=8),病毒组小鼠腹腔接种0.10ml TCID50为10-5/L的Nancy株柯萨奇病毒B3(CVB3)病毒液,分别于接种后第7d、10d、14d、28d随机处死8只;对照组小鼠腹腔接种0.10ml不含病毒的Eagle氏液,28d时处死。取小鼠心肌组织采用HE染色,在光镜下观察心肌病理变化,计算心肌组织病理学积分;采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测心肌组织中Gal-9 mRNA与Tim-3 mRNA的表达。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中Gal-9的含量。结果1.病毒组小鼠接种CVB3后心肌炎的发病率为100%。光镜下可见心肌细胞变性、坏死和部分心肌纤维断裂,炎细胞浸润,呈现典型的病毒性心肌炎病变。2.病毒组小鼠感染CVB3后外周血中Gal-9的含量升高,10d时达高峰,14d时开始下降,28天时基本降至正常。3.与对照组比较,病毒组小鼠外周血中Gal-9含量在第7、10、14d均明显升高(F=16.64,p<0.01)。4.病毒组小鼠外周血中Gal-9的含量与心肌组织病理积分呈正相关(r=0.75,p<0.05)。5.病毒组小鼠感染CVB3后心肌组织中Gal-9 mRNA的表达在第7d时升高,10d时达高峰,14d时开始下降,28d时基本降至正常。6.与对照组比较,病毒组小鼠7d、10d时心肌组织中Gal-9 mRNA的表达均明显增强(F=3.94,p<0.01)。7.病毒组小鼠心肌组织中Gal-9 mRNA的表达与心肌组织病理积分呈正相关(r=0.74,p<0.05)。8.病毒组小鼠外周血中Gal-9的含量与心肌组织中Gal-9 mRNA的表达呈正相关(r=0.71,p<0.05)。9.与对照组比较,第7d、10d、14d时小鼠心肌组织中Tim-3 mRNA的表达均明显增强(F=20.58,p<0.05)。10.病毒组小鼠感染CVB3病毒后心肌组织中Tim-3 mRNA的表达增强,10d时达高峰,14d时开始下降,28d时基本降至正常。11.病毒组小鼠心肌组织中Tim-3 mRNA的表达与心肌组织病理积分呈正相关(r=0.68,p<0.05)。结论1.小鼠感染柯萨奇病毒B3后急性期外周血中Gal-9的含量升高,心肌组织中Gal-9 mRNA与Tim-3 mRNA的表达增强,表明Gal-9及其受体Tim-3在病毒性心肌炎的发生发展中起一定作用。2.病毒组小鼠外周血中Gal-9的含量及心肌组织中Gal-9 mRNA的表达均与心肌组织病理积分呈正相关,表明Gal-9在病毒性心肌炎小鼠中的表达与心肌炎症病变程度有关,外周血Gal-9含量可作为心肌炎病变严重程度的一个指标。
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