【摘 要】
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目的:建立一种改进的高分辨熔解曲线(High resolution melting curve,HRM)并探索其亚甲基四氢叶酸还原酶(Methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因C677T多态性(rs1801133)检测应用。方法:针对MTHFR C677T设计一对带有M13接头的通用引物,通过改进HRM反应体系,提高HRM的分析性能;并利用M13接头作
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目的:建立一种改进的高分辨熔解曲线(High resolution melting curve,HRM)并探索其亚甲基四氢叶酸还原酶(Methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因C677T多态性(rs1801133)检测应用。方法:针对MTHFR C677T设计一对带有M13接头的通用引物,通过改进HRM反应体系,提高HRM的分析性能;并利用M13接头作为测序引物直接对HRM产物进行Sanger测序验证。收集2016.06至2017.10来自本院体检中心的外周血样本1030例,应用改进的高分辨熔解曲线检测其MTHFR C677T单核苷酸多态性。结果:成功建立了一种改进的高分辨熔解曲线并成功应用于临床样本MTHFR C677T多态性检测。1030例脱氧核糖核酸(Deoxynucleic acid,DNA)中,CC基因型占39.13%,CT基因型占48.16%,TT基因型占12.71%。结论:通过改进HRM成功建立了一种检测MTHFR C677T的基因分型方法,该方法具有简便经济、快速准确和高通量的特点,适用于临床大规模检测。
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