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研究目的子痫前期(preeclampsia)属于妊娠期高血压疾病(hypertensive complicating pregnancy)的范畴,是妊娠期特有的疾病,是导致孕产妇和围产儿病率及死亡率的主要原因之一,据估计全世界每年因子痫死亡的妊娠妇女约为5万,严重影响母儿健康,因此深受广大临床产科医生的重视。其临床症状根据受累器官的不同而呈多样性,如肾脏累及而出现蛋白尿;肝脏累及而出现肝酶升高;心血管系统除血压升高外还可出现心功能衰竭;中枢神经系统受累后可出现头晕、视物模糊等;胎盘的功能下降可引起宫内生长受限、胎儿窘迫;严重子痫前期可出现DIC、HELLP综合征、产妇抽搐、昏迷甚至死亡,而胎儿也可因胎盘早剥而胎死宫内等不良结局。近世纪来,子痫前期的发病率并没有明显改善,因此探索子痫前期的病因和发病机制,积极防治子痫前期,对提高母婴健康水平具有重要意义。近年来有关于其免疫学发病机制被更多学者关注,鉴于CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞的过继输注在原因不明复发性流产妇女中的积极疗效,本课题旨在探讨CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞(CD4~+CD25~+T)和CD4~+CD25high调节性T淋巴细胞(CD4~+CD25highTr)在正常未孕妇女外周血、子痫前期(Preeclampsia,PE)患者和正常早、晚期妊娠妇女外周血的表达频率及其在PE发病中的意义,以期对PE的防治开拓出前瞻性的思路。研究方法从05年10月始于安徽省立医院产科及门诊搜集PE患者30例、正常早期妊娠13例、正常晚期妊娠22例、正常非妊娠组15例,于早8:00～10:00抽取肘静脉血2ml,肝素钠(1:9)抗凝,标本在室温采集后4h内测定。检测时取2支试管,每管加抗凝全血100μl,其中一管作为对照管,加PE-CD4和FITC同型阴性对照试剂各10μl,另一管加入FITC-CD25和PE-CD4各10μl,混匀后室温下避光反应15min,加入1ml溶血剂,37℃水浴箱内放置10min,待完全溶血后,立刻上流式细胞仪检测。分析数据时首先根据对照管CD4~+细胞群Mouse-IgG1-FITC的荧光强度为背景界定CD25~+细胞的荧光阈值,然后以该阈值判断试验管中CD4~+CD25~+细胞群,再以CD4~+CD25~+细胞群的平均荧光强度(Mean Fluorescence Intensity,MFI)为基准,圈定CD4~+CD25highT细胞亚群,将MFI恰是CD4~+CD25~+细胞2倍的亚细胞群定为CD4~+CD25highT细胞。所有结果均以CD4~+CD25~+及CD4~+CD25highTr细胞占CD4~+T细胞的百分比表示。通过对比各组CD4~+CD25~+T和CD4~+CD25highTr的表达率,分析其与PE的关系。研究结果1.PE组与正常晚期妊娠组CD4~+CD25~+调节性T细胞水平比较:正常晚期妊娠组CD4~+CD25~+T细胞与CD4~+CD25high Tr细胞占CD4~+T细胞的比率分别为12.26±1.32%和1.18±0.05%;PE患者组CD4~+CD25~+T细胞与CD4~+CD25high Tr细胞占CD4~+T细胞的比率分别为6.64±1.10%和0.53±0.17%。PE患者组CD4~+CD25~+调节性T细胞水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P=0.001);CD4~+CD25high Tr细胞水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。2.正常晚孕组与其他组间的比较:正常非妊娠组妇女外周血CD4~+CD25~+T(10.8±1.05%)和正常早期妊娠组CD4~+CD25~+T(11.21±1.40%)差异无统计学意义,但均低于正常晚期妊娠组,差异有显著性(P<0.05)。结论采用流式细胞仪来测定CD4~+CD25~+T细胞的表达率效果较好; CD4~+CD25~+T细胞在人类孕早期显著升高,参与了正常妊娠的维持,有可能是调控母胎界面局部免疫耐受形成的一个重要因素,CD4~+CD25~+T细胞数量的减少可能与子痫前期的发生有关。基于本次研究的结论及CD4~+CD25~+T的主动免疫治疗在原因不明复发性流产妇女中较好的疗效,有望成为子痫前期患者的实验室早期诊断的新指标及免疫治疗的新思路。