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生长性状是养猪生产者十分关注的重要经济性状,猪Ghrelin、IGF-Ⅱ、IGFBP2基因是影响猪生长性状的重要候选基因。本研究选用1日龄、27日龄、90日龄、150日龄、180日龄的蓝塘猪和长白猪共60头猪(每阶段每品种各6头)为实验材料,应用ELISA法测定其血清中的Ghrelin浓度,用实时荧光定量PCR法检测胃组织中Ghrelin基因mRNA表达量以及肝脏和肌肉中IGF-Ⅱ、IGFBP2基因mRNA表达量,以研究两个品种间生长性状的发育性变化情况。实验还应用PCR-RELP法对Ghrelin基因A265G位点、IGF-Ⅱ基因G13518A位点、IGFBP2基因T1218G位点进行标记-表达量关联分析。主要研究结果如下:
1.蓝塘猪180日龄时血清中Ghrelin含量最高,显著高于其他日龄阶段(P<0.05)。长白猪180日龄时含量最高,显著高于90日龄时(P<0.05)。90日龄时蓝塘猪显著高于长白猪(P<0.05)。90日龄蓝塘猪Ghrelin血清中的含量与胃中Ghrelin表达量呈显著正相关(P<0.05):180日龄蓝塘猪Ghrelin血清中的含量与肝脏中IGF-Ⅱ基因表达量呈显著正相关(P<0.05)。
2.通过胃组织中Ghrelin基因mRNA表达的发育性变化比较,结果表明:两品种均是1日龄表达量最高。蓝塘猪1日龄和180日龄显著高于27日龄、90日龄(P<0.05):长白猪1日龄显著高于其他阶段(P<0.05);长白猪1日龄和27日龄显著高于蓝塘猪(P<0.05)。相关分析表明,长白猪150日龄表达量与肝脏中IGF-Ⅱ表达量呈极显著正相关(P<0.01),180日龄表达量与肝脏中IGF-Ⅱ表达量呈显著正相关(P<0.05)。
3.通过IGF-Ⅱ基因mRNA表达的发育性变化比较,结果表明:两品种肝脏和背肌中均是1日龄时表达量最高。蓝塘猪肝脏中1日龄表达量显著高于150日龄(P<0.05);长白猪1日龄显著高于90、150和180日龄(P<0.05):两品种比较,长白猪均高于蓝塘猪,但未达到显著水平。蓝塘猪和长白猪背肌中1日龄均显著高于其他阶段(P<0.05):且长白猪90日龄显著高于150日龄、180日龄(P<0.05)。两品种肝脏和背肌中表达量无显著差异。相关分析表明,蓝塘猪27日龄肝脏中表达量与IGF-Ⅱ背肌中表达量呈显著负相关(P<0.05),90日龄表达量与肝脏中IGFBP2表达量呈显著正相关(P<0.05)。
4.通过IGFBP2基因mRNA表达的发育性变化比较,结果表明:肝脏中,蓝塘猪1日龄最高,显著高于27日龄和150日龄(P<0.05);长白猪180日龄最高,但各阶段差异不显著。背肌中,蓝塘猪1日龄最高,长白猪90日龄时最高,各阶段间差异不显著。
5.对3个基因进行标记.表达量关联分析表明:Ghrelin基因A265G位点与180日龄胃中的表达量存在显著相关(P<0.05),AB>AA>BB,且AA型与AB型、BB型差异显著(P<0.05);IGF-Ⅱ基因G13518A位点与IGF-Ⅱ基因在肝脏和背肌中的表达量均相关不显著;IGFBP2基因T1218G位点与IGFBP2基因在90日龄肝脏中表达量存在极显著相关(P<0.01),AB>从>BB,但各基因型差异不显著。