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目的:建立简便、快速、重现性好的检测方法同时测定牛奶中丹诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、双氟沙星、沙拉沙星、恩诺沙星6种氟喹诺酮残留量。 方法:1.采用薄层色谱(TLC)法对牛奶中可能残留上述六种氟喹诺酮进行的检测方法进行研究。样品经优化的QuEChERS样品前处理技术提取、净化后，以甲醇-三氯甲烷-氨水-乙酸乙酯(10∶15∶2∶4)为展开剂，以3％的三氯化铽乙醇溶液为显色剂，在紫外光灯(365 nm)下检视;2.采用高效液相色谱串联荧光检测器(HPLC-FLD)法检测动物源性食品牛奶中上述6种氟喹诺酮类药物。按上述方法制备供试品溶液，采用荧光检测器，以Waters XBridgeTM C18柱(4.6×250 mm，5μm)为色谱柱，以乙腈和含0.1％甲酸的20 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相，激发波长和发射波长分别为280 nm、450 nm，柱温为30℃，流速为1.0 mL/min;3.采用高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-DAD)法快速筛查牛奶中上述六种氟喹诺酮类药物残留。以Waters XBridgeTM C18柱(4.6×250 mm，5μm)为色谱柱，以乙腈和含0.1％甲酸的20 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相，紫外检测器，检测波长279 nm;4.采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法确证牛奶中上述六种氟喹诺酮类药物残留种类及量的研究。以Agilent ZORBAX SB-C18(2.1×50 mm，1.8μm)为色谱柱，以乙腈和含0.1％甲酸的20 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相，流速为0.5 mL/min，柱温为45℃;进样量为2μL，ESI离子源，毛细管电压为3000～4000 kV;干燥气温度为300℃;干燥气流量为5 mL/min;雾化气压力为50 psi;以N2为载气;5.进一步验证HPLC-FLD法测定牛奶中上述6种氟喹诺酮类药物残留的适用性及可行性。采用相同的前处理方法，在另一实验室测定供试品溶液，以Waters XBridgeTM C18柱(4.6×250 mm，5μm)为色谱柱，在另一型号的高效液相色谱仪上按相同的色谱条件进行测定。 结果:1.在薄层色谱法中，6种氟喹诺酮在紫外光灯(365 nm)下检视，分离效果比较好，并且每种成分的Rf值均在0.2～0.8之间;2.在HPLC-FLD法中，6种氟喹诺酮分离度均较好(R＞1.5)，6种氟喹诺酮在1～40 ng/mL的浓度范围内呈良好的线性关系(γ=0.9999);样品加标平均回收率在95.38％～100.08％之间，相对标准偏差(RSD)在1.08％～4.37％之间;3.在HPLC-DAD法中，6种氟喹诺酮分离良好，6种氟喹诺酮在5～200 ng/mL的浓度范围内呈良好的线性关系(γ=0.9999)。样品加标平均回收率在95.77％～97.13％之间，相对标准偏差(RSD)在1.74％～3.03％之间。4.在超高效液相色谱结合质谱法中，6种氟喹诺酮在2～100 ng/mL的浓度范围内呈良好的线性关系，样品平均加标回收率在104.52％～121.11％之间，RSD在3.02％～11.25％之间。5.在6种氟喹诺酮药物残留验证实验中，6种氟喹诺酮分离度均较好，6种氟喹诺酮在1～100 ng/mL浓度范围内呈良好的线性关系(γ=0.9999)。样品加标平均回收率在91.07％～104.55％之间，相对标准偏差(RSD)在1.05％～4.28％之间。 结论:本课题建立的TLC方法简单快速，适用于养牛场及基层单位初步筛查动物源性食品牛奶中氟喹诺酮类药物残留;HPLC-DAD方法操作简便，具有高通量、高选择性等特点，该方法针对基层单位特别是基础设备较差单位快速筛查动物源性食品牛奶中氟喹诺酮类药物残留尤为适宜;HPLC-FLD方法检出限低，具有高通量、高灵敏度和高选择性等特点，针对需进行大规模抽检的检测机构来说，该方法尤为适宜;UPLC-MS/MS方法因其具有灵敏度高、结果准确的特性，通常用于阳性样品中检出成分的确证;由上述验证性实验的结果可以说明本课题建立的HPLC-FLD方法重现性较好、适用性较强。